RIPK4低表达影响骨肉瘤细胞增殖与丝裂原活化蛋白激酶信号通路的研究
屈涛
刘华
杨成伟
王世勇
1.解放军兰州总医院脊柱外科, 甘肃兰州,7300502.解放军兰州总医院脊柱外科, 甘肃兰州,7300503.解放军兰州总医院脊柱外科, 甘肃兰州,7300504.解放军兰州总医院脊柱外科, 甘肃兰州,730050
摘要:目的 探讨受体相互作用蛋白激酶4 (receptor interacting protein kinase 4,RIPK4)低表达抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路异常的相关性研究.方法脂质体转染法将RIPK4-siRNA转入骨肉瘤MG-63细胞;四甲基偶氮唑盐(methylt hiazolyldiphenyl-tet razolium bromide,MTT)实验检测骨肉瘤MG-63细胞增殖情况;免疫荧光实验检测RIPK4 siRNA低表达对MAPK表达分布的影响;蛋白质印迹实验检测骨肉瘤MG-63细胞中RIPK4-siRNA对MAPK信号通路的影响.结果 MTT结果表明,和空白组比较,RIPK4-siRNA转染组48 h时细胞生存率明显较低(P<0.05).免疫荧光实验显示,RIPK4低表达后,RIPK4-siRNA转染组细胞中,MAPK主要分布在细胞核,且总体表达减少.蛋白质免疫印迹法结果显示,RIPK4-siRNA转染MG-63细胞后,RIPK4蛋白水平明显下调,同时,MAPK在细胞胞浆的表达减少,而在细胞胞核的表达分布增多.灰度值分析表明,和空白组比较,RIPK4-siRNA转染组MAPK下游的因子细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinase,ERK)、p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinases,JNK)、核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的灰度值明显降低(P<0.05).结论 在MG-63细胞中,RIPK4的低表达影响MAPK激酶的分布及表达,RIPK4的低表达对MG-63细胞增殖抑制可能和MAPK/ERK/p38/JNK/NF-κB信号通路异常有关.
关键词:骨肉瘤MG-63受体相互作用蛋白激酶4丝裂原活化蛋白激酶通路
分类号:R738.1(运动系肿瘤)
资助基金:国家自然科学基金(81601905)
论文发表日期:2018-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 149-152,168 )
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华南国防医学杂志

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ISSN:1009-2595
年,卷(期):2018,32(3)
所属栏目:实验研究