缺氧对内毒素耐受的THP-1细胞免疫功能的影响
唐忠志1
费丹婷2
韩璇1
陈晓娟1
朱果果1
1.430070 湖北武汉,中部战区总医院急诊医学科2.嘉兴市第一人民医院急诊科
摘要：目的 观察缺氧对发生内毒素耐受(endotoxin tolerance,ET)的人单核巨噬细胞(human mononuclear mac-rophages,T HP-1)免疫功能的影响并探讨其可能机制.方法 T HP-1细胞接受革兰氏阴性菌脂多糖(lipopolysaccha-ride,LPS)一次打击后分为四组.空白组:去除干预因素后继续培养,缺氧组:在空白组基础上予以氯化钴(CoCl2)处理,对照组:在空白组基础上予以LPS二次打击以形成ET,实验组:在空白组基础上给与缺氧及LPS二次打击.收集各组细胞总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA),实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time-polymerase chain reac-tion,qPCR)检测白细胞介素1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)、白细胞介素10(inter-leukin-10,IL-10)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、CD80、CD40、胶原结构巨噬细胞受体(macrophage receptor with collagenous structure,MARCO)及缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α).收集各组细胞上清液,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞因子IL-1β、IL-12、IL-10及TGF-β1表达;蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞因子CD80、CD40、MARCO及HIF-1α蛋白表达.结果 qPCR结果显示,与对照组相比,实验组IL-1β、IL-12、CD80及CD40转录上调(P<0.05);但IL-10、TGF-β1及MARCO的转录下调(P<0.05).ELISA结果显示,与对照组相比,实验组IL-1β及IL-12分泌增加、IL-10及TGF-β1减少(P<0.05).Western blot结果显示,与对照组相比,实验组CD80及CD40蛋白表达增加、MARCO蛋白表达减少(P<0.05).与空白组和缺氧组相比,实验组及对照组的HIF-1α基因转录及蛋白表达均增加(P<0.05);但与对照组相比,实验组HIF-1α基因转录及蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 缺氧可破坏LPS诱导的THP-1细胞ET状态,从而加重炎症反应,该现象可能未通过影响HIF-1α而实现.
关键词：内毒素耐受缺氧人单核巨噬细胞脂多糖炎症反应细胞因子免疫功能缺氧诱导因子1α
分类号：R446.63(诊断学)
资助基金：湖北省卫生和计划生育委员会联合基金项目(WJ2018H0086)
论文发表日期：2021-06-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 401-406,421 )
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