噬菌体库中小分子生物毒素抗体筛选策略优化的研究
毛冠超
刘一潇
徐庆强
孙铭学
裴志鹏
肖凯
200433 上海,海军军医大学海军医学系
摘要：目的 验证采用不同洗脱策略从非特异性人工合成噬菌体抗体库中获取小分子生物毒素抗体的特异性,以优化筛选手段.方法 制备石房蛤毒素(saxitoxin,STX)、黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)以及T-2毒素3种小分子的完全抗原,依托噬菌体纳米抗体全合成库进行四轮筛选,并在第3、4轮分别采用酸碱洗脱及竞争洗脱两种方式,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析筛选过程中产生的噬菌体上清液特异性并进行统计分析.结果 STX完全抗原与载体蛋白不同波长紫外吸收光下存在差异证明偶联成功,第2轮筛选产生的噬菌体上清液特异性较强,继续使用酸碱洗脱产生的噬菌体上清特异性逐渐丢失,而竞争洗脱后噬菌体上清特异性仍随筛选次数增加而增强,AFB1与T-2毒素完全抗原筛选后特异性表现与STX结果相似.结论 不同洗脱方式对从非特异性噬菌体抗体库中获取小分子生物毒素抗体影响较大,竞争洗脱可能更优于酸碱洗脱.
关键词：噬菌体展示技术全合成噬菌体展示库小分子生物毒素抗体筛选策略
分类号：R99(毒物学（毒理学）)
资助基金：国家自然科学基金(81871521)军队重点学科建设项目(HL21JD1208)上海市公共卫生体系建设三年行动计划优秀青年人才项目(2020-2022;GWV-10.2-YQ48)
论文发表日期：2022-09-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 679-682,716 )
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