沉默circAMOTL1对结直肠癌Caco-2细胞生物学行为影响的体外实验研究
于曦
王楠
金飞
支宇
116021 辽宁大连,大连大学附属新华医院肛肠外科
摘要:目的 探讨沉默circAMOTL1对结直肠癌细胞生物学行为的影响及其可能机制.方法 实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测结直肠癌组织与癌旁组织中circAMOTL1、miR-296-5p的表达量.Pearson相关分析探讨结直肠癌组织中circAMOTL1、miR-296-5p表达量的相关性.体外培养人结直肠癌细胞 Caco-2,sh-NC、sh-circAMOTL1、miR-NC、miR-296-5p mimic 分别转染至 Caco-2 细胞(sh-NC 组、sh-circAMOTL1 组、miR-NC 组、miR-296-5p mimic 组),sh-circAMOTL1 与miR-296-5p inhibor 共转染至 Caco-2 细胞(sh-circAMOTL1+miR-296-5p inhibor 组).流式细胞术、Transwell 实验、Western blot 法分别检测细胞凋亡、迁移及侵袭、Cleaved-caspase 3蛋白表达.双荧光素酶报告实验检测circAMOTL1和miR-296-5p靶向调控作用.结果 结直肠癌组织中circAMOTL1表达量高于癌旁组织(2.79±0.30vs.0.89±0.15,P<0.05),miR-296-5p表达量低于癌旁组织(0.42±0.09 vs.1.12±0.14,P<0.05).circAMOTL1 与 miR-296-5p 呈负相关(r=-0.8125,P<0.0001).转染sh-circAMOTL1或miR-296-5p mimic后,迁移及侵袭细胞数减少(P均<0.05),细胞凋亡率、Cleaved-caspase 3蛋白水平升高(P均<0.05).circAMOTL1可靶向调控miR-296-5p的表达.共转染sh-cir-cAMOTL1和miR-296-5p inhibor后,迁移及侵袭细胞数增多(P均<0.05),细胞凋亡率、Cleaved-caspase 3蛋白水平降低(P均<0.05).结论 沉默circAMOTL1可通过靶向调控miR-296-5p表达而抑制结直肠癌细胞迁移、侵袭及诱导细胞凋亡.
关键词:结直肠癌circAMOTL1miR-296-5p迁移侵袭凋亡
分类号:R735(消化系肿瘤)
资助基金:大连市高层次人才创新支持计划项目(2017RQ079)
论文发表日期:2023-02-28
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 89-95 )
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