小电导的钙激活钾离子通道1的真核表达及其在乳腺癌细胞增殖中的作用
张蓉1
周军2
胡华3
徐氚4
陈映红5
1.510010广东广州,南部战区总医院检验科2.解放军95829部队门诊部3.中部战区总医院药剂科4.中部战区总医院消毒供应科5.中部战区总医院质量管理科
摘要：目的 构建重组的真核表达质粒pENTER-小电导的钙激活钾离子通道1(small conductance calcium-gated K+channel 1,SKCa1),并研究其在乳腺癌细胞密歇根癌症基金会7号(Michigan cancer foundation-7,MCF-7)中的表达;观察SKCa1的亚细胞定位;检测SKCa1在乳腺癌细胞增殖中的作用.方法 从MCF-7细胞中抽提总RNA并逆转录成cDNA;以cDNA为模板扩增SKCa1基因,通过无缝克隆技术将基因片段克隆至真核表达质粒pENTER中;质粒转染MCF-7细胞后,分别用Western blot和免疫荧光实验检测SKCa1的表达及亚细胞定位,用细胞计数试剂盒8(cell count-ing kit-8,CCK-8)实验测定SKCa1的细胞增殖效应.结果 成功构建了带有标签的重组真核表达质粒pENTER-SKca1,并在乳腺癌细胞MCF-7中高效表达;SKCa1主要分布于细胞质和细胞核,并能促进乳腺癌细胞增殖.结论 成功制备了研究SKCa1的必要工具原料并对其分子机制进行了初步探索,为深入研究SKCa1在乳腺癌细胞中的信号转导作用奠定了基础.
关键词：小电导的钙激活钾离子通道乳腺肿瘤密歇根癌症基金会7号细胞真核表达
分类号：R737.9(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期：2023-02-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 102-106 )
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