SOX9在角膜内皮损伤过程中的表达及功能
孙图南
李晓琦
李宗源
王丽强
黄一飞
100039 北京,解放军总医院第三医学中心眼科医学部
摘要：目的 探究性别决定区Y框蛋白9(sex determining region Y box protein 9,SOX9)在角膜内皮损伤过程中的表达及功能.方法 通过转录组数据库分析人角膜内皮损伤与SOX9表达的关联.冷冻法构建小鼠角膜内皮损伤模型,每只小鼠左眼造模、右眼空白对照,采用裂隙灯照相、眼前节光学相干断层扫描技术(optical coherence tomo-graphy,OCT)、免疫荧光技术评估动物模型质量,角膜铺片免疫荧光染色观察损伤后内皮细胞中SOX9的表达变化.分别用低浓度(30μmol/L)和高浓度(50μmol/L)的甲萘醌对人角膜内皮细胞(B4G12)处理3 h(短时间组)、6h(中时间组)、12 h(长时间组)、24 h(超长时间组),构建细胞模型.采用显微镜照相、细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)实验评估细胞模型质量,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)、West-ern blot检测SOX9和介导角膜内皮-间质转化(endothelium-mesenchymal transition,EndMT)关键转录因子Snail家族转录抑制因子2(snail family transcriptional repressor 2,SNAIL2)的表达变化.结果 数据库资料显示在角膜内皮损伤代表性疾病Fuchs角膜内皮营养不良(Fuchs'endothelial corneal dystrophy,FECD)患者中,FECD 3期以上患者角膜内皮SOX9表达量比2期患者明显升高(P＜0.05),且SOX9的下游基因富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)表达量比正常人明显升高(P＜0.05).在动物模型中,对照组角膜内皮铺片免疫荧光染色显示无SOX9荧光,损伤后短期出现大量SOX9荧光,损伤后中期、长期SOX9荧光回归极低水平.在甲萘醌处理的细胞模型中,SOX9表达随处理时间的延长呈现先升高后降低的趋势;同时发现SNAIL2的表达变化也会随甲萘醌处理时间的延长呈现先升高后降低的趋势.结论 SOX9的表达随角膜内皮损伤进程产生变化,并与损伤修复中的EndMT紧密相关.
关键词：角膜内皮细胞性别决定区Y框蛋白9Snail家族转录抑制因子2损伤修复内皮-间质转化
分类号：R772.2(眼纤维膜疾病)
资助基金：国家自然科学基金(82070921)北京市自然科学基金面上项目(7212098)
论文发表日期：2023-08-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 637-642,690 )
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