制备抗菌肽LL37修饰的金纳米颗粒及其体外转染和抗菌实验研究
王淞1
陈宏鑫1
徐凯1
吴娟娟1
吴高贤2
杨斌1
1.430070 湖北武汉,中部战区总医院烧伤整形科2.430070 湖北武汉,中部战区总医院保健科
摘要：目的 制备抗菌肽LL37修饰的金纳米颗粒(gold nanoparticles,AuNPs)(AuNPs@LL37),并研究其理化性质的表征参数、体外转染效率及其抗菌能力.方法 通过化学还原法和配体交换法制备AuNPs@LL37,紫外分光光度仪检测吸收光谱;纳米粒度仪测定其水合粒径、表面电位(Zeta电位);透射电镜观察其形态特征;超敏型二喹啉甲酸(micro bicinchoninic acid assay,micro BCA)蛋白定量试剂盒测量其表面固定的多肽量;荧光猝灭排除实验检测AuNPs@LL37与质粒DNA的结合情况;细胞计数试剂盒(cell counting kit 8,CCK-8)实验检测AuNPs@LL37的细胞毒性;体外转染实验检测AuNPs@LL37的转染能力;体外抗菌实验检测AuNPs@LL37的抗菌能力.结果 制备得到带正电荷[Zeta 电位为(35.40±1.20)mV、直径为(7.10±1.60)nm],表面固定 LL37 多肽的 AuNPs@LL37.当 AuNPs@LL37∶pDNA=5∶1时,AuNPs@LL37/pDNA Zeta电位达到正电荷饱和;荧光猝灭排除实验表明,AuNPs@LL37与DNA有较强的结合能力;体外转染实验表明,AuNPs@LL37能够介导增强型绿色荧光蛋白质粒-血管内皮生长因子165(plasmid enhanced green fluorescent protein-vascular endothelial growth factor 165,pEGFP-VEGF165)转染细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白,其转染率可达(89.52±7.36)％;体外抗菌实验表明,AuNPs@LL37和AuNPs@LL37/pDNA均具有杀菌作用.结论 AuNPs@LL37是一种新型的功能化纳米颗粒,既能够作为基因载体又具有抗菌能力.
关键词：抗菌肽LL37金纳米颗粒细胞转染抗菌能力
分类号：R945(药剂学)R96(药理学)
资助基金：国家自然科学基金(82102340)中部战区总医院博士后项目(BSH022)
论文发表日期：2023-09-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 725-730 )
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