基于MAPK信号通路探讨双醋瑞因对IL-1β诱导软骨细胞退变的干预作用
陈利锋
张传成
杨丽莎
刘雪晴
王档
夏浩
张玉杰
430070 湖北武汉,中部战区总医院风湿免疫科
摘要：目的 基于丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路,从细胞分子水平探讨双醋瑞因对膝骨性关节炎(osteoarthritis,OA)的抗炎机制.方法 选取2～3月龄新西兰兔5只,提取并培养软骨细胞至第2代软骨细胞,使用白细胞介素1β(interleukin 1 beta,IL-1β)进行干预后获得退变软骨细胞模型.将分离培养的软骨细胞分为空白对照组、IL-1β组、双氯芬酸钠组和双醋瑞因低浓度组、双醋瑞因中浓度组、双醋瑞因高浓度组.空白对照组不进行任何干预,其他组选用IL-1β诱导的退变软骨细胞模型.双氯芬酸钠组采用1.6 mg/L双氯芬酸钠处理退变软骨细胞;双醋瑞因低、中、高浓度组分别采用0.1、1、10mol/L的双醋瑞因处理退变软骨细胞.采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组细胞上清液基质金属蛋白酶 13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、IL-17、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)浓度,分别采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和 Western blot 检测各组细胞中 p38、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、p65、MMP-13 mRNA及蛋白表达水平.结果 ELISA结果显示,与空白对照组相比,IL-1β组细胞上清液中MMP-13、IL-17、TNF-α浓度显著升高(P均＜0.05);与IL-1β组相比,双氯芬酸钠组和双醋瑞因低、中、高浓度组细胞上清液中MMP-13、IL-17、TNF-α浓度显著降低(P均＜0.05);与双氯芬酸钠组相比,双醋瑞因高浓度组MMP-13、IL-17、TNF-α浓度明显降低(P均＜0.05);与双醋瑞因低浓度组相比,双醋瑞因高浓度组细胞上清液中MMP-13、IL-17、TNF-α浓度显著降低(P 均＜0.05).RT-qPCR、Western blot 结果显示,与空白对照组相比,IL-1 β 组 p38、JNK、ERK、p65、MMP-13 mRNA表达和蛋白水平显著升高(P＜0.05);与IL-1β组相比,双氯芬酸钠组和双醋瑞因低、中、高浓度组p38、JNK、ERK、p65、MMP-13 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P均＜0.05);与双氯芬酸钠组相比,双醋瑞因高浓度组p38、JNK、ERK、p65、MMP-13 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P均＜0.05);与双醋瑞因低浓度相比,双醋瑞因高浓度组p38、JNK、ERK、p65、MMP-13 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P均＜0.05).结论 MAPK信号通路在IL-1β诱导的新西兰兔退变软骨细胞中过表达.双醋瑞因可以通过调控MAPK信号通路,起到保护IL-1β诱导的新西兰兔退变软骨细胞的作用.
关键词：骨性关节炎双醋瑞因白细胞介素1β丝裂原活化蛋白酶信号通路退变软骨细胞
分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：湖北省医学青年拔尖人才项目(1371)
论文发表日期：2023-10-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 817-821 )
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