SERPINE1影响结肠癌细胞RKO和LoVo的增殖与凋亡
陈德合1
李登玉2
郭刚3
王杰4
周倩4
李洪涛3
1.476000 河南商丘,商丘市第五人民医院普外科2.476000 河南商丘,商丘市第五人民医院超声科3.联勤保障部队940医院普外科4.兰州大学第二临床医学院
摘要：目的 探究丝氨酸蛋白酶抑制剂1(serine proteinase inhibitor family E member 1,SERPINE1)在结肠癌(colon adenocarcinoma,COAD)中的表达、意义及对COAD细胞增殖与凋亡的影响,了解其在COAD进展中发挥的生物学功能.方法 通过 Gene Expression Profilling Interactive Analysis 2.0(GEPIA 2.0)数据库分析 SERPINE1 在 COAD中的表达与分期及预后关系.收集作者医院5例COAD患者癌组织与对应的正常结肠组织标本,应用Western blot实验验证SERPINE1在COAD中的表达;接着构建SERPINE1过表达与干扰表达的慢病毒载体,进行细胞转染,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和 West-ern blot对实验细胞筛选并验证过表达和干扰表达的效率;进而通过细胞计数试剂盒(cell counting kit 8,CCK-8)和Ho-echst 细胞核染色检测细胞增殖与凋亡;最后通过Western blot实验了解其对增殖标志物Ki-67(marker of proliferation Ki-67,MKI67)、Bcl-2 关联 X 蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)与 B 细胞淋巴瘤 2 基因(B cell lymphoma 2,Bcl-2)比值的影响.结果 通过GEPIA 2.0数据库查找并分析COAD中SERPINE1表达与临床分期和预后关系发现,SER-PINE1在COAD中表达水平高于正常结肠组织,SERPINE1的表达水平与临床分期正相关,而与预后生存总生存期负相关(P均＜0.05).CCK-8实验结果表明,oe-RKO组和oe-LoVo组COAD细胞在48h时间点吸光度(optical density,OD)值大于oe-RKO-NC组和oe-LoVo-NC组,sh-RKO-822组和sh-LoVo-822组COAD细胞在48 h时间点OD值小于sh-RKO-NC和sh-LoVo-NC组(P均＜0.05).Hoechst凋亡细胞核染色结果表明,oe-RKO组和oe-LoVo组COAD细胞凋亡数量低于oe-RKO-NC组和oe-LoVo-NC组,sh-RKO-822组和sh-LoVo-822组COAD细胞凋亡数量明显高于sh-RKO-NC 组和 sh-LoVo-NC 组(P均＜0.05).Western blot 结果显示,oe-RKO 组和 oe-LoVo 组 COAD 细胞 MKI67 蛋白表达明显高于 oe-RKO-NC 组和 oe-LoVo-NC组,Bax/Bcl-2 明显低于 oe-RKO-NC 组和 oe-LoVo-NC 组;sh-RKO-822组和sh-LoVo-822组COAD细胞MKI67蛋白表达明显低于sh-RKO-NC组和sh-LoVo-NC组,Bax/Bcl-2明显高于sh-RKO-NC组和sh-LoVo-NC组(P均＜0.05).结论 SERPINE1在COAD中高表达、与临床分期正相关,而与患者预后负相关;SERPINE1可能通过影响COAD细胞MKI67表达和Bax/Bcl-2促进COAD RKO和LoVo细胞的增殖,抑制其凋亡.
关键词：结肠癌丝氨酸蛋白酶抑制剂1增殖凋亡生物学功能
分类号：R735.3(消化系肿瘤)
资助基金：甘肃省科技计划项目(22JR5RA005)部队专项培育面上项目(2021yxky021)
论文发表日期：2024-04-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 277-284 )
英文信息