miR-126-5p过表达激活PI3K/Akt信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响研究
李静1
张晨峰1
于丽娜1
邢颖1
张亚男2
1.071000 河北保定,保定市第一中心医院心血管内三科2.河北北方学院附属第一医院心内科
摘要：目的 探究miR-126-5p过表达对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的影响.方法 实验方案一:将48只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、MIRI组(MIRI模型造模)、MIRI+ag-omiR-NC 组(MIRI 模型造模+agomiR-NC 干预)、MIRI+agomiR-126-5p 组(MIRI 模型造模+miR-126-5p agomiR 干预),每组12只.实验方案二:另取48只SD大鼠用简单随机化方法分为假手术组、MIRI组(MIRI模型造模)、MIRI+LY294002 组[MIRI 模型造模+磷脂酰肌醇 3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)抑制剂 LY294002 干预]和 MI-RI+LY294002+agomiR-126-5p 组(MIRI 模型造模+PI3K 抑制剂 LY294002+miR-126-5p agomiR 干预).采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测大鼠体内 miR-126-5p mRNA 水平;采用酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测大鼠血清肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase isoenzyme MB,CK-MB)、肌红蛋白(myoglobin,Mb)、心肌肌钙蛋白 I(cardiac troponin I,cTnI)、白细胞介素 6(interleu-kin 6,IL-6)、IL-1β 和肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)水平;采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色检测大鼠心肌组织病理损伤程度;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位缺口标记技术(terminal de-oxynucleotidyl transferase TdT-mediated biotin dUTP nick end-labeling,TUNEL)检测心肌组织细胞凋亡及相关凋亡蛋白 Bcl-2 关联 X 蛋白(Bcl-2-associated X,Bax)/B 淋巴细胞瘤 2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)和 cleaved Caspase-3/Caspase-3比值;采用试剂盒检测大鼠体内氧化应激标记物超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialde-hyde,MDA)含量;采用Western blot检测相关蛋白磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylated-PI3K,p-PI3K)/PI3K和磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated-protein kinase B,p-Akt)/Akt比值的表达水平.结果 与MIRI组比较,MIRI+ag-omiR-126-5p组miR-126-5p mRNA表达量升高,CK-MB、Mb和cTnI水平降低,病理损伤程度明显改善,细胞凋亡率降低,Bax/Bcl-2 和 cleaved Caspase-3/Caspase-3 降低,TNF-α、IL-1β、IL-6 水平降低,SOD 活性升高、MDA 含量降低,p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt升高(P均＜0.01).此外,miR-126-5p过表达能够部分逆转PI3K抑制剂LY294002对MIRI大鼠心肌病理损伤、炎症反应、氧化应激和通路相关蛋白表达的影响.结论 miR-126-5p过表达对MIRI大鼠模型心肌损伤具有保护作用.
关键词：心肌缺血再灌注损伤miR-126-5p炎症因子氧化应激磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶/磷酸化蛋白激酶B信号通路
分类号：R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：河北省医学科学研究课题项目(20220285)
论文发表日期：2024-11-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 916-921,987 )
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