腺相关病毒过表达Trx1对镉暴露诱导的小鼠肝损伤和铁死亡的作用研究
曹正旺1
刘坤1
肖宏宇1
郑山根1
喻田甜2
1.430070 湖北武汉,中部战区总医院输血医学科2.430070 湖北武汉,中部战区总医院疾病预防控制科
摘要：目的 探讨腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)上调肝组织中硫氧还蛋白1(thioredoxin1,Trx1)表达对镉(Cadmium,Cd)暴露诱导的小鼠肝损伤与肝细胞铁死亡的影响.方法 24只雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、Trx1组、Cd组和Trx1+Cd组,每组6只,通过尾静脉注射AAV建立Trx1过表达动物模型,给予腹腔注射2 mg/kg氯化镉(cadmium chloride,CdCl2)建立Cd暴露模型.在Cd暴露24 h后麻醉并处死小鼠,进行免疫荧光染色,采用免疫蛋白印迹法与实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)检测小鼠肝脏Trx1表达;检测血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspar-tate aminotransferase,AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和总胆红素(total bilirubin,TBIL)含量;检测肝组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的含量;采用苏木精-伊红染色观察肝组织病理改变,透射电镜观察肝细胞线粒体形态变化;免疫蛋白印迹法检测小鼠肝组织中铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、核因子 E2 相关因子 2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,NRF2)、血红素加氧酶 1(heme oxygenase 1,HO-1)、溶质载体家族 7 成员 11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、前列腺素内氧化酶还原酶2(prostaglandin endoperoxide synthase 2,PTGS2)蛋白表达.结果 与对照组比较,Trx1组小鼠肝组织中Trx1蛋白和mRNA表达水平显著升高(P＜0.05).与Cd组小鼠比较,Trx1+Cd组小鼠血清中ALT、AST和LDH水平下降,肝组织中MDA水平下降,SOD、CAT和GSH-Px含量升高(P均＜0.05);肝细胞坏死及炎性浸润程度降低;线粒体皱缩程度缓解,双层膜密度降低,线粒体基质肿胀减轻.与Cd组小鼠比较,Trx1+Cd组小鼠肝组织中GPX4、NRF2、HO-1和SLC7A11蛋白表达水平升高(P均＜0.05),PTGS2蛋白表达水平下降(P＜0.01).结论 AAV过表达Trx1可以改善Cd暴露引起的肝损伤和氧化应激,其机制可能与激活SLC7A11/GPX4信号通路、抑制肝细胞铁死亡有关.
关键词：硫氧还蛋白-1镉暴露腺相关病毒肝损伤铁死亡
分类号：R114(卫生基础科学)R575(消化系及腹部疾病)
资助基金：湖北省自然科学基金青年项目(2021CFB161)中部战区总医院育英计划项目(ZZYC202102)
论文发表日期：2025-02-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 95-101 )
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