富血小板血浆与人毛囊干细胞共移植对大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合的作用机制
徐林胜子1
邱伟明2
王钰3
刘跃平4
刁波3
1.430062 湖北武汉,武汉科技大学医学部医学院2.中部战区总医院烧伤整形科3.中部战区总医院基础医学实验室4.中部战区总医院疾病预防控制科
摘要：目的 探讨富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)与人毛囊干细胞(hair follicle stem cells,HFSCs)共移植对大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合的作用及其机制.方法 通过细胞计数试剂盒(cell counting kit 8,CCK-8)细胞增殖实验、细胞划痕实验探究PRP在体外培养条件下对人HFSCs增殖、迁移的影响.使用28只SD大鼠建立深Ⅱ度烧伤模型,随机取4只造模后大鼠的烧伤创面组织和正常皮肤组织,经苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色后观察鉴定模型建立是否成功.将造模成功的24只大鼠按随机数字表法分为对照组[在烧伤创面组织下多点注射500 μl磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)]、HFSCs组(在烧伤创面组织下多点注射500μl PBS混匀的人HFSCs悬液)、PRP组(在烧伤创面组织下多点注射500 μl PRP)、PRP+HFSCs组(在烧伤创面组织下多点注射PRP混匀的人HF-SCs悬液),每组6只.各组每周给予2次相应干预.干预第7、14、20天计算各组大鼠烧伤创面的愈合率;第20天取各组大鼠烧伤创面组织,通过免疫组织化学染色技术检测CD31阳性血管数;通过Masson染色观察烧伤创面组织胶原纤维再生情况;通过实时荧光逆转录聚合酶链反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)检测烧伤创面组织中白细胞介素1 β(interleukin 1 beta,IL-1β)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)、B淋巴细胞瘤 2 基因(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)基因的mRNA相对表达量;通过 Western blot法检测烧伤创面组织中 IL-1β、SOD1和Bcl-2蛋白的相对表达量.结果 在培养基中使用10％PRP能显著增强HFSCs的增殖与迁移能力.与对照组、HFSCs组、PRP组比较,在干预第7、14、20天,PRP+HFSCs组大鼠创面组织愈合率最高(P均＜0.05);第20天,PRP+HFSCs 组 CD31 阳性血管数最多(P＜0.05),IL-1β、TGF-β、MMP-9的 mRNA 表达水平最低,Bcl-2、SOD1 的 mR-NA 与蛋白表达水平最高(P均＜0.05),IL-1β蛋白表达水平最低(P均＜0.05).此外,与对照组、HFSCs组、PRP组比较,PRP+HFSCs组大鼠烧伤创面组织胶原纤维最致密有序,无过度胶原纤维沉积.结论 在体外培养条件下,PRP 可促进人HFSCs增殖与迁移.PRP与人HFSCs共移植可以控制烧伤部位炎症反应与氧化应激,促进新生血管形成,从而加快创面愈合.
关键词：深Ⅱ度烧伤富血小板血浆毛囊干细胞移植血管生成创面愈合瘢痕
分类号：R363(病理学)
资助基金：湖北省卫生健康委员会面上项目(WJ2019M263)
论文发表日期：2025-05-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 378-385,402 )
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