负载小鼠胎盘来源间充质干细胞水凝胶促进糖尿病小鼠创面愈合的研究
吴海斌1
秦晶2
张翌1
1.430070 湖北武汉,中部战区总医院普通外科2.430070 湖北武汉,中部战区总医院输血科
摘要：目的 探讨负载小鼠胎盘来源间充质干细胞(placental derived mesenchymal stem cells,PDMSCs)甲基丙烯酰化明胶(methacrylated gelatin,GelMA)水凝胶对糖尿病小鼠创面愈合的作用及其机制.方法 采用光固化法制备PDMSCs-GelMA水凝胶,通过扫描电子显微镜观察PDMSCs-GelMA水凝胶的微观结构,采用5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2-deoxyuridine5,EdU)检测水凝胶中PDMSCs的增殖情况;采用活细胞/死细胞双染色法检测水凝胶中PDMSCs 的存活情况;采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测含有 PDMSCs-GelMA水凝胶的浸提液中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth fac-tor,VEGF)表达情况,依据是否含有水凝胶将培养的PDMSCs分为水凝胶组和无水凝胶组,水凝胶浸提液组和无水凝胶浸提液组.利用打孔器建立小鼠背部全层皮肤损伤模型,并将小鼠分为磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered saline,PBS)组、PDMSCs组和PDMSCs-GelMA组,每组9只小鼠,各组小鼠分别予以等体积PBS、PDMSCs及PDMSCs-Gel-MA处理,在第1、7、14天分别观察小鼠背部创面愈合情况,同时采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和Mas-son染色分别检测第7天创面皮肤组织重塑和真皮胶原组织情况,免疫组织化学染色检测第7天皮肤创面表皮干细胞、新生血管以及炎症情况.结果 成功制备PDMSCs-GelMA水凝胶,扫描电子显微镜观察到PDMSCs-GelMA呈多孔且相互连接的内部结构,细胞生长良好且充满孔隙.EdU法检测证实含有水凝胶组的PDMSCs增殖率明显高于无水凝胶组(P＜0.05).活细胞/死细胞双染色法结果显示有水凝胶组的PDMSCs活性略高于无水凝胶组,但两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).ELISA结果显示,培养第3、7天,水凝胶浸提液组中的EGF、VFGF浓度均低于无水凝胶浸提液组(P均＜0.05).与PBS组比较,PDMSCs组和PDMSCs-GelMA组小鼠的伤口愈合率显著提高(P均＜0.05);与PDMSCs组比较,PDMSCs-GelMA组小鼠的伤口愈合率显著提高(P＜0.05).HE染色和Masson染色结果提示,PDM-SCs-GelMA组创面新生肉芽组织和胶原沉积率明显高于PBS组和PDMSCs组.术后第7天,与PBS组比较,PDMSCs组和PDMSCs-GelMA组的Brdu和CD11b的阳性数均升高,且PDMSCs-GelMA组高于PDMSCs组(P均＜0.05);CD45阳性数均降低,且PDMSCs-GelMA组低于PDMSCs组(P均＜0.05).结论 PDMSCs-GelMA水凝胶具备良好的营养渗透性,PDMSCs-GelMA水凝胶通过促进糖尿病创面肉芽组织增生、新生微血管形成和上皮化,同时减轻炎症反应,最终促进创面愈合.
关键词：胎盘来源间充质干细胞甲基丙烯酰化明胶水凝胶创面愈合糖尿病炎症反应
分类号：R587.2(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：湖北省自然基金面上项目(2023AFB1044)武汉市知识创新项目(2023020201020524)
论文发表日期：2025-09-28
在线出版日期：2025-10-24（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 748-755 )
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