+Gz重复暴露大鼠脑cDNA消减文库的构建
蔡庆
刘红巾
林凯
姜建东
朱美财
1.空军总医院分子生物学研究中心,北京,1000362.空军总医院分子生物学研究中心,北京,1000363.空军总医院分子生物学研究中心,北京,1000364.空军总医院分子生物学研究中心,北京,1000365.空军总医院分子生物学研究中心,北京,100036
摘要：目的应用抑制性消减杂交技术构建+Gz重复暴露大鼠脑和正常大鼠脑差异表达的cDNA消减文库,为筛选+Gz暴露大鼠脑差异表达基因,探讨+Gz引起脑损伤的分子机制奠定基础.方法 Wister大鼠随机分成对照组和+Gz重复暴露组,对照组大鼠G值为+1 Gz, 实验组大鼠在动物离心机上经历了3次+10 Gz/1 min(两次间间隔30 min)作用,于暴露后6 h处死取脑.分别从+Gz重复暴露组和对照组大鼠脑中提取poly(A)+RNA,依次合成单链及双链cDNA,用RsaⅠ酶切成大小不等的片段.将+Gz重复暴露组cDNA分为两组,分别与两种不同的接头连接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将PCR产物与T/A载体连接构建+Gz暴露大鼠脑cDNA消减文库.结果成功构建具有高消减效率的+Gz暴露大鼠脑cDNA消减文库,非特异性cDNA片段被有效地消减,特异表达的cDNA得到富集.结论 +Gz暴露大鼠脑cDNA消减文库的建立为进一步筛选、克隆+Gz重复暴露大鼠脑差异表达基因奠定了基础.
关键词：+GzcDNA抑制性消减杂交文库脑
分类号：R8542.21(航空航天医学)R854(航空航天医学)
资助基金：军队医药卫生科研项目(98D033)空军后勤部科研项目(KH9919076)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 415-418 )
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