免疫毒素IL-18-PE38原核表达载体的构建及其鉴定
李虹1
李明远2
吕梅励3
蒋忠华2
张林3
1.四川大学华西基础与法医学院微生物学教研室,四川成都,6100412.Department of Microbiology, West China School of Preclinical and Forensic Medicine, Sichuan University, Chengdu Sichuan 6100413.The Key Lab of Biotherapy of Human Diseases, Sichuan University, Chengdu Sichuan 610041
摘要：目的构建绿脓杆菌外毒素PE38融合鼠IL-18基因的原核表达载体,并鉴定其产物在大肠杆菌中的表达.方法首先经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得小鼠IL-18基因,再通过酶切及连接反应,构建小鼠IL-18与PE38融合基因的原核表达载体PRKL-IL18-PE38,重组载体经PCR、限制性内切酶及DNA序列测定证实连接片段正确后,转染感受态大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE和蛋白免疫印迹法分别测定其相对分子质量及特异性.结果成功构建了IL-18-PE38免疫毒素的原核表达载体,重组载体在大肠杆菌中获得了稳定的表达,表达产物的相对分子质量与预期值一致,且所表达蛋白可被抗IL-18的特异性抗体所识别.结论获得了IL-18-PE38融合基因在原核系统的表达,为进一步研究其对Th1细胞的靶向细胞毒性及临床应用奠定了基础.
关键词：IL-18-PE38重组免疫毒素原核表达基因构建
分类号：R392.12(医学免疫学)
资助基金：新材料领域项目(2002AA214101)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 395-398 )
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