hper1干扰质粒的构建及hper1功能的初步研究
叶珊
汪宇辉
胡丽娟
刘延友
王晓佳
王正荣
1.四川大学华西医学中心基础与法医学院生物医学工程研究室,四川成都,6100412.四川大学华西医学中心基础与法医学院生物医学工程研究室,四川成都,6100413.四川大学华西医学中心基础与法医学院生物医学工程研究室,四川成都,6100414.四川大学华西医学中心基础与法医学院生物医学工程研究室,四川成都,6100415.四川大学华西医学中心基础与法医学院生物医学工程研究室,四川成都,6100416.四川大学华西医学中心基础与法医学院生物医学工程研究室,四川成都,610041
摘要：目的构建高效的针对hper1(人类period1基因)的干扰质粒,并对hper1的功能进行初步研究.方法选择4个hper1的干扰位点,根据位点序列合成构建4个pTER-hper1干扰质粒,并通过测序验证.将4种干扰质粒分别转染至SH-SY5Y细胞,经马血清休克诱导后,提取细胞总RNA,RT-PCR检测hper1mRNA的表达,鉴定干扰效果.提取细胞总蛋白,Western Blot 检测P-p44/42丝裂原活化蛋白激酶(mitagen-actinated pratein kinase,MAPK)表达.结果 RT-PCR鉴定显示pTER-hper1-Ⅱ干扰质粒干扰效率最高,hper1表达量降低84.9%.Western Blot显示hper1表达受抑制后,P-p44/42 MAPK水平升高.结论成功构建并筛选到具有显著干扰效率的pTER-hper1干扰质粒,为进一步研究hper1的功能奠定了基础,并发现hper1对MAPK通路具有负相调控作用.
关键词：生物节律干扰质粒RNA干扰人类近日节律基因1P-p44/42 丝裂原活化蛋白激酶
分类号：R852.6(航空航天医学)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30070278)中国科学院项目（非规范项目）(39970275)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 125-128 )
英文信息