防御素HNP-3成熟肽酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活和毒性检测
马生秀1
邓璐霞1
罗林2
彭媛媛1
路会侠1
张敏1
熊文碧1
冯云1
吴琦1
王伯瑶1
黄宁1
1.四川大学华西医学中心基础医学与法医学院免疫教研室,四川成都,6100412.四川大学华西医院麻醉科,四川成都,610041
摘要：目的 用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测.方法 培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBluescript-SK-II质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,PCR及测序鉴定.重组诱饵质粒用缺陷培养基筛选方法进行自激活和毒性检测. 结果构建的重组质粒pBluescript-SK-II-HNP-3,经测序鉴定,插入片段为HNP-3成熟肽的cDNA序列.亚克隆构建的重组诱饵质pGBKT7-HNP-3,测序鉴定表明其插入目的 基因序列无误.重组诱饵质粒自激活和毒性检测显示无自激活现象发生,对酵母细胞AH109无毒性作用. 结论成功构建了防御素HNP-3成熟肽的酵母双杂交诱饵载体;为用酵母双杂交技术研究与防御素HNP-3成熟肽相互作用蛋白质打下了基础.
关键词：防御素HNP-3成熟肽酵母双杂交
分类号：R392.32(医学免疫学)Q789(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(3040763)国家自然科学基金(30671963)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 151-153 )
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