用荧光强度反映Cbfal活性成骨细胞模型的构建
仝飞飞1
戴钟铨2
郭飞马2
丁2
柏2
谭映军2
吕金印1
李莹辉2
1.西北农林科技大学理学院,陕西杨凌,7121002.中国航天员科研训练中心航天医学基础与应用国家重点实验室,北京,100094
摘要：目的 构建稳定表达由60SE2启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的MG63细胞株,并筛选出能反映Cbfal活性的细胞株.方法 合成60SE2启动子的序列,并将其构建到T载体中:然后通过双酶切得到启动子片段;与去除CMV启动子的报告基因载体pEGFP-Nl的酶切片段连接,构建真核表达载体;并转染到MG63细胞系,经G418筛选得到了稳定转染60SE2-EGFP基因的MG63细胞株.用不同浓度的IGF-I和VD,处理,通过EGFP荧光强度分析,ALP活性测定,筛选出能够响应IGF-I和VD3的细胞株.结果 构建了pUC-60SE2扩增载体和p60SE2-EGFP真核表达载体,通过稳定转染以及IGF-I、VD_3筛选获得一株荧光强度随IGF-I和VD_3处理而增强的细胞株.OSE-MG63.结论 构建了能反应Cbfal活性的成骨细胞模型,为进一步研究微重力对Cbfal的转录活性及信号传导途径的影响奠定了基础.
关键词：成骨细胞60SE2MG63基因表达荧光强度
分类号：R854(航空航天医学)
资助基金：国家自然科学基金(30870589)中国航天医学工程预先研究(SJ200809)科技部科研项目(2006CB705704)基础科研项目(al620090025)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 15-19 )
英文信息