Gabra3基因敲除对小鼠神经元细胞睡眠功能影响的探究
张力中1
唐育杰2
孙毅3
于琦4
卢学春5
1.山西医科大学基础医学院,太原 0300002.山西医科大学管理学院,太原 0300003.军事医学研究院毒理学与医学对策国家重点实验室,北京 1008534.山西医科大学基础医学院,太原 030000;山西医科大学管理学院,太原 0300005.山西医科大学基础医学院,太原 030000;解放军总医院第二医学中心血液病科,国家老年疾病临床医学研究中心,北京 100853
摘要：目的 构建Gabra3基因敲除细胞模型,探讨敲除Gabra3基因后小鼠神经元细胞在转录、蛋白水平的变化,研究Gabra3基因敲除后睡眠深度增加的机制.方法 构建多种sgRNA序列,使用CRISPR/Cas9系统敲除鼠源GT1-7神经元细胞系中的Gabra3基因,通过基因测序检测敲除效率,使用TA克隆、蛋白免疫印迹实验验证敲除结果,细胞增殖实验验证敲除表型,并提取总RNA进行转录组测序,提取总蛋白进行蛋白质测序.结合多种生物信息学分析方法,评估Gabra3基因敲除对GT1-7神经元细胞功能的影响.结果 Gabra3基因敲除后,皮质醇和醛固酮的合成与分泌、昼夜节律等通路显著富集,并筛选出BMP2、GLI2、DLL1三个关键基因,蛋白组结果显示Gabra3基因敲除后产生了广泛的扰动.结论 Gabra3基因敲除可能通过调控激素分泌相关基因表达,提高睡眠深度.
关键词：Gabra3慢波睡眠CRISPR/Cas9多组学激素调节
资助基金：国家重点研发计划(2021YFC2701704)军队后勤自主科研课题(2022HQZZ06)山西省基础研究计划项目(202303021221132)山西省科技创新人才团队专项(202304051001017)
论文发表日期：2025-06-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 206-213 )
英文信息