对虾白斑综合症病毒VP37基因诱饵重组载体的构建、转化与自激活作用检测
张莉
青岛农业大学生命科学学院微生物学教研室,山东,青岛,266109
摘要:把对虾白斑综合症病毒(White syndrome spot virus ,WSSV)黏附蛋白VP37的基因C末端截去102个碱基后设计了一对引物,通过PCR扩增出目的片段.用其构建酵母双杂交诱饵载体,并检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用和自激活活性.结果获得截短的VP37基因片段,并成功克隆入酵母双杂交系统PGBKT7 DNA-BD载体中,测序结果表明序列完全正确.把重组载体转化酵母菌AH109并检测自激活作用.结果显示表达的融合蛋白没有激活ADE2, HIS3这2个报告基因,但激活了MEL1,该融合蛋白对酵母菌AH109无毒性.可利用其它2种报告基因将其应用于酵母双杂交系统,筛选cDNA文库中与之相互作用的基因.
关键词:WSSV黏附蛋白酵母双杂交系统重组载体
分类号:Q178.53(水生生物学)
资助基金:国家自然科学基金(30271020)青岛市自然科学基金(03-2-JZP-10;Q2002D02)教育厅科技项目(620975)
论文发表日期:2010-01-01
在线出版日期:2026-05-22(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 129-136 )
英文信息
