裂殖壶菌pks基因启动子的克隆及活性检测
王振东
臧晓南
丛晓梅
朱清
中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室,山东青岛266003
摘要：为了探究裂殖壶菌(Aurantiochytrium limacinum)合成DHA的关键酶基因pks1和pks3的启动子活性,本实验首先通过染色体步移技术得到pks1和pks3基因的5'端上游序列,然后经生物信息学软件分析初步确定两段序列具有启动子特征,含有上游调控元件,可能具有启动子活性;进而以绿色荧光蛋白作为报告基因,构建了原核表达载体pAcGFP1-1-pks1 promoter和pAcGFP1-1-pks3 promoter,以及真核表达载体pYD1-pks1 promoter-GFP 和pYD1-pks3 promoter-GFP,并分别转化大肠杆菌E.coli BL21和酿酒酵母S.cerevisiae EBY100,通过荧光光谱及SDS-PAGE分析等来检测重组菌株绿色荧光蛋白表达情况.结果表明这两段序列,能够使绿色荧光蛋白在原核表达系统及真核表达系统中实现异源表达,具有启动活性,可以用作基因工程中的启动子元件.
关键词：染色体步移技术pks基因启动子荧光光谱SDS-PAGE
分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)
资助基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(BS2012HZ017)
论文发表日期：2022-10-28
在线出版日期：2026-05-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 27-32 )
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