降低胃癌细胞硫氧还蛋白5基因表达影响增殖及浸润的研究
张林
侯艳红
李楠
王艳梅
张琨鹏
1.解放军309医院消化科,北京,1000912.解放军309医院消化科,北京,1000913.解放军309医院消化科,北京,1000914.解放军309医院消化科,北京,1000915.解放军309医院消化科,北京,100091
摘要：目的 探讨降低硫氧还蛋白5 (EndoPDI)基因表达对于胃癌细胞增殖状态、细胞周期、凋亡等生物学特性及浸润转移能力的影响.方法 EndoPDI基因特异的核糖核酸干扰(RNAi)载体通过脂质体介导法转染人胃癌细胞系细胞(MKN45),筛选获得稳定转染的细胞系,经过免疫细胞化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印记(Western-blot)法证实.使用生长曲线法、平板克隆形成实验、细胞迁徙实验等方法分析稳定转染株相关生物学特性的变化,每种检测实验均设立RNAi载体转染细胞组、点突变对照组和空白MKN45细胞组.结果 稳定转染的EndoPDI RNAi细胞系经过免疫细胞化学法、RT-PCR法及Western blot法证实,表达抑制率可达70％左右.与对照组细胞相比,EndoPDI RNAi组细胞株生长减慢,各时间点细胞计数显著低于对照组(P＜0.05);流式细胞仪检测细胞周期显示,S期比例显著低于对照组,G0-G1期比例显著高于对照组(P＜0.05).平板克隆形成实验结果显示,EndoPDI RNA i组克隆形成率显著低于对照组(P＜0.05);细胞迁徙实验结果提示,EndoPDI RNA i组穿膜率显著低于对照组(P＞0.05).结论 EndoPDI基因可能具有促进细胞生长增殖作用,降低EndoPDI表达可减少处于分裂周期细胞比例、提高凋亡比例,降低EndoPDI基因表达可能对胃癌细胞的恶性生物学行为有抑制作用.
关键词：胃癌EndoPDI基因RNA干扰细胞凋亡
分类号：R735.2(消化系肿瘤)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 20-23 )
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