腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1的构建和鉴定
张正1
刘丹平1
蒲勤2
郭韬1
张男1
1.锦州医学院附属第一医院骨科,辽宁,锦州,1210002.第四军医大学生化教研室,陕西,西安,710032
摘要：目的构建腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1,为构建表达具有抗原表位标记的骨形态发生蛋白2(bone morpbogenetic protein 2,BMP-2),并同时表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)报告分子的腺病毒真核细胞表达载体打下基础.方法对目的基因供体质粒pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因测序和序列内部存在的限制性内切酶识别位点进行分析,利用PCR(polymeras chain reaction,PCR)技术对pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因突变,以去除翻译终止密码子后的基因序列并添加新的酶切识别位点Xho Ⅰ.测序检测突变情况,将突变后的BMP2基因(BMP2+基因)定向连入腺病毒穿梭质粒pShuttleCMV-IRES-hrGFP-1,通过限制性内切酶酶切图谱分析鉴定获得的重组质粒.结果重组质粒经双酶切鉴定图谱正确.结论成功构建了pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1.
关键词：腺病毒穿梭载体骨形态发生蛋白2(BMP-2)
分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(30070757)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-4,10 )
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