漆黄素对高糖诱导视网膜Müller细胞氧化应激炎症反应的作用
胡千慧1
曹睿1
凌云1
郁盛雪2
1.锦州医科大学口腔医学院2.锦州医科大学辽宁省糖尿病感知功能障碍重点实验室, 辽宁 锦州121000
摘要：目的 探讨漆黄素(fisetin,FIS)对高糖诱导的视网膜Müller细胞的作用及其机制.方法 采用100 mmol/L葡萄糖模拟体外高糖环境,实验分为4组:对照组、高糖组、漆黄素+高糖组、漆黄素+高糖+TCBN(Akt/Gsk3β信号通路抑制剂)组.通过CCK8法检测Müller细胞增殖活力;硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;JC-1法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);免疫荧光检测线粒体膜通透性转换孔(membrane permeability transition pore,mPTP)及IL-1β、IL-6、TNF-α表达;实时荧光定量PCR检测IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达;Western Blot检测炎症因子及信号通路蛋白表达.结果 与高糖组相比,漆黄素组降低MDA含量,提高SOD活力,明显抑制ROS产生,抑制mPTP开放,稳定MMP(P<0.05);与漆黄素组相比,TCBN组明显阻断了漆黄素的这种作用.免疫荧光和qPCR结果发现,与高糖组相比,漆黄素组能明显降低IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子表达水平(P<0.05);与漆黄素组相比,TCBN组各炎症因子表达增加(P<0.05).同时Western Blot结果发现,与高糖组相比,漆黄素组能明显增加p-Akt、p-Gsk3β蛋白表达(P<0.05);而TCBN组p-Akt、p-Gsk3β蛋白表达减少(P<0.05).结论 漆黄素通过降低细胞内MDA含量、 增加SOD活性、 抑制ROS产生、mTPT开放来维持MMP稳定,减少炎症因子表达从而减轻氧化应激损伤,这种作用与激活Akt/Gsk3β信号通路有关.
关键词：糖尿病视网膜病变Müller细胞氧化应激炎症Akt/Gsk3β信号通路
分类号：R285(中药学)
资助基金：国家级大学生创新创业训练计划项目(202110160015)
论文发表日期：2022-12-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 13-20 )
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