肿瘤坏死因子α上调脑血管内皮细胞RH蛋白C表达的机制
陆慧
李东升
锦州医科大学附属第一医院,辽宁 锦州 121000
摘要：目的 研究在肝性脑病中发挥强效作用的促炎因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cell,HBMEC)中RH蛋白C(rhesus glycoprotein of C,RHCG)表达的调控和潜在的作用机制.方法 HBMEC复苏,传 5 代,以适宜浓度铺孔板在孵箱中培养,并通过与TNF-α(浓度为 0.1 μg/mL内皮细胞培养基 ECM)的共培养,按照作用时间不同分组,运用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription PCR,RT-PCR)及Western Blot,检测HBMEC中RhCG mRNA及蛋白随着TNF-α作用时间延长表达量的变化,并统计变化趋势.根据以上结果选择表达量最高的时间点加PKC抑制剂Safingol处理,分组:(1)TNF-α处理0h组;(2)TNF-α处理24h组;(3)Safingol单独处理组;(4)TNF-α+Safingol抑制剂组:预先用Safingol处理HBMEC细胞 1h后,再予TNF-α刺激24 h.应用Western Blot方法检测HBMEC中RhCG 蛋白的表达水平,并统计RhCG 蛋白不同组别的变化趋势.结果 RhCG蛋白随着TNF-α作用时间的延长表达增加,24 h表达量最高.RhCG mRNA随着TNF-α作用时间的延长表达增加,24 h表达量最高.加入处理因素PKC-α特异性抑制剂Safingol后,RhCG蛋白的表达随之下降,差异有统计学意义.结论 肿瘤坏死因子TNF-α可以上调HBMEC细胞中RhCG mRNA及蛋白的表达.PKC-α参与TNF-α上调HBMEC中Rh-CG 蛋白表达的调控.
关键词：肝性脑病肿瘤坏死因子人脑微血管内皮细胞氨转运蛋白
分类号：R575.3(消化系及腹部疾病)
资助基金：辽宁省教育厅重点项目(LJKZ0816)
论文发表日期：2024-08-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 19-25 )
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