干预 miR-206/MECOM/TGF-β/smad3 轴对三阴性乳腺癌恶性进展的影响机制

谷泽慧; 王亚帝; 谭琦; 陈素贤; 何东宁

摘要：目的以三阴性乳腺癌细胞株231为研究对象,探讨干预miR-206/MECOM/TGF-β/smad3轴对三阴性乳腺癌恶性进展的影响及机制.方法使用 ualcan 与 Kaplan Meier Plotter 在线分析 MECOM、TGF-βR1、TGF-βR2、smad3、smad4、HDAC1、HDAC2及CTBP在乳腺癌组与正常乳腺组之间差异表达和与预后的关系.采用细胞共培养及共转染技术,在MDA-MB-231细胞中分别沉默转录因子MECOM、过表达和沉默miR-206,以及将二者共转染,采用RT-qPCR法检测TGF-βR1、TGF-βR2、smad3、smad4、HDAC1、HDAC2 及 CTBPmRNA 表达水平;结果 ualcan 在线分析在 TCGA-BRCA 中MECOM、TGF-βR2乳腺癌组低于正常乳腺组,差异有统计学意义(P＜0.05);Kaplan Meier Plotter在线分析MECOM、TGF-βR1、TGF-βR2、smad3、smad4、HDAC1、HDAC2及CTBP差异表达与预后的关系.在TCGA数据库结果提示MECOM低表达较高表达患者中位生存期(overall survival,OS)长(P＜0.05),smad3与smad4高表达较低表达患者OS长,差异有统计学意义(P＜0.05),TGF-βR1、TGF-βR2、HDAC1、HDAC2及CTBP高表达与低表达患者OS差异无统计学意义(P＞0.05).单纯沉默 MECOM 后,与空白对照组相比,Si-MECOM 组的 TGF-βR2、HDAC1、HDAC2、smad3、smad4、CTBP mRNA 表达水平降低(P＜0.05);单纯干预 miR-206 后,MECOM、TGF-βR1、TGF-βR2、HDAC1、HDAC2、smad4、CTBP mRNA 表达水平降低(P＜0.05);共转染 MECOM 与 miR-206 后,与 Si-MECOM 组相比,siMECOM+inhibitor miR-206组的 TGF-βR1、HDAC1、smad3、smad4mRNA 表达水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05),TGF-βR2、HDAC2、CTBP mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-206对MECOM的调控可能是通过影响TGF-βR2、HDAC2、CTBPmRNA的表达来抑制TGF-β/SMAD通路活化阻止TNBC进展.