红景天苷通过NF-κB信号通路对高糖诱导HT22海马区神经元凋亡的保护作用
丁佳媛1
于洪丹1
郁盛雪1
刘文强1
郑晴予2
刘盈睿3
左中夫1
1.锦州医科大学人体解剖学教研室;辽宁省糖尿病感知功能障碍重点实验室2.锦州医科大学附属第三医院3.锦州医科大学第一临床医学院,辽宁锦州 121000
摘要：目的 探讨红景天苷(salidroside,SAL)对高糖条件下HT22海马区神经元细胞凋亡的影响,并探讨NF-κB信号通路参与其中的机制.方法 将小鼠HT22海马区神经元置于含10％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)和1％青-链霉素双抗的DME/F12培养基中,放置于37 ℃、5％CO2条件的培养箱中进行体外培养.不同浓度葡萄糖(25、50、100 mM)以及不同浓度SAL(37.5、75、150、300 μM)作用海马区神经元细胞24、48、72 h.增强型细胞活力(cell counting kit-8,CCK-8)试剂盒检测HT22细胞增殖活力,以筛选适宜高糖及SAL药物浓度;流式细胞仪检测HT22海马区神经元细胞凋亡率;Hoechst 33342染色检测HT22海马区神经元细胞凋亡情况;活性氧试剂盒检测各组细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的变化;JC-1线粒体膜电位试剂盒(JC-1 mitochondrial membrane potential assay kit,JC-1)检测线粒体膜电位变化;Western Blot法分析各组细胞内磷酸化NF-κB p65(p-p65)、cleaved Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果 通过CCK-8实验确定高糖浓度为50 mM,红景天苷浓度为300 µM进行后续实验.与对照组相比,高糖诱导HT22海马区神经元细胞48 h后,细胞增殖活力明显下降(P＜0.01),细胞凋亡率明显增加(P＜0.01),细胞内ROS含量明显增加(P＜0.01),线粒体膜电位明显下降(P＜0.01),p-p65、cleaved Caspase-3及Bax蛋白表达增加(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达明显降低(P＜0.01),与高糖组相比,高糖+SAL组可以明显逆转以上结果.结论 SAL可抑制高糖条件下HT22细胞凋亡,其机制可能与抑制氧化应激、抑制NF-κB p65磷酸化、恢复线粒体膜电位、上调Bcl-2蛋白表达、下调Bax及cleaved Caspase-3蛋白表达有关.
关键词：SAL糖尿病脑病HT22NF-κB凋亡
分类号：R587.2(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：辽宁省教育厅基金项目(LJKMZ20221241)辽宁省自然科学基金(2023-MS-312)
论文发表日期：2024-12-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 14-21,30 )
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