苦参碱通过PTEN调控PI3K/AKT信号通路减轻慢性脑缺血所致认知功能障碍
金娜1
高源泽1
史宝湘2
单伟3
1.锦州医科大学第三临床医学院2.锦州医科大学护理学院3.锦州医科大学基础医学院解剖学教研室,辽宁 锦州 121000
摘要：目的 探讨苦参碱(Matrine)对慢性脑缺血(chronic brain ischemia,CCI)大鼠认知功能障碍及磷酸酯酶肿瘤抑制基因(gene of phosphate and tension homology deleted on chromosome ten,PTEN)/磷脂酰肌醇-3-羟激酶(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase,PI3K)/AKT信号通路的影响.方法 选择SPF级SD大鼠,应用动脉永久结扎(Two-vessel occlusion,2-VO)法建立CCI大鼠模型.将大鼠随机分为7 组:假手术组(Sham组)、脑缺血组(CCI组)、苦参碱低剂量组(Matrine-L组)、苦参碱中剂量组(Matrine-M组)、苦参碱高剂量组(Matrine-H组)、苦 参碱+PTEN病毒过表达组(Matrine+AAV-PTEN组)和苦参碱+病毒空载体组(Matrine+AAV-NC组).2-VO法术后第 1 天开始腹腔注射 3 种不同剂量苦参碱,每天1 次,连续8 周.用PPI分析苦参碱可能的靶点.分子对接验证苦参碱和PTEN的结合活性.Morris水迷宫实验观察苦参碱对CCI大鼠认知功能的影响.神经功能评分和尼氏染色观察神经损伤.ELISA测定海马组织中枢神经特异蛋白(s-100β)和神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)水平.免疫荧光检测PTEN和神经元(neuron,NeuN)共定位.TUNEL染色检测神经元凋亡.结果 苦参碱可以通过氨基酸残基ARG-173、GLU-299、ILE-303 和TYR-176稳定地结合到PTEN蛋白结构上.中剂量苦参碱对CCI大鼠治疗效果最佳.CCI组较Sham组逃避潜伏期显著缩短(P<0.01).Matrine组较CCI组较大鼠逃避潜伏期显著延长(P<0.01).而Matrine+AAV-PTEN组较Matrine组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.01).CCI组较Sham组神经功能评分较差,细胞萎缩,s-100β和NSE表达升高,神经元凋亡增加(P<0.01).Matrine较CCI组神经功能评分提高,细胞形态恢复,s-100β 和 NSE 表达降低,神经元凋亡减少(P<0.01).然而在Matrine组基础上给予AAV-PTEN后,Matrine的保护作用被逆转(P<0.01).结论 Matrine能改善CCI大鼠认知障碍,这可能与抑制PTEN/PI3K/AKT信号通路有关.
关键词：慢性脑缺血认知功能障碍苦参碱PTENPI3K
分类号：R743(神经病学与精神病学)
资助基金：辽宁省教育厅科学研究经费项目(JYTJCZR2020087)辽宁省大学生创新训练计划项目(S202210160013)辽宁省教育厅高校基本科研项目(LJ212410160086)
论文发表日期：2025-06-30
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 7-14 )
英文信息