hOSM在COS-7细胞中表达及对人A375黑色素瘤细胞的生长抑制作用
叶建新1
盛伟华2
马丽丽2
谢宇峰2
缪竞诚2
杨吉成
1.苏州大学附属儿童医院2.215007,江苏,苏州,苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室
摘要：目的:克隆人抑瘤素(hOSM)基因并构建真核表达载体,在COS-7细胞中表达具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的基因重组蛋白.方法:用PMA刺激U937细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得cDNA,与pUCmT载体连接,经PCR获得全长hOSM基因,再与pcDNA3.1/myc-his(-)A真核表达载体连接,构建真核表达重组质粒pcDNA3.1A-hOSM,经PCR和限制性酶切及DNA测序鉴定后,在COS-7细胞中进行瞬时表达,采用RT-PCR鉴定hOSM基因的转录,MTT法检测表达产物抑制A375细胞生长的活性.结果:重组入载体中的基因片段不仅方向正确,而且所克隆的hOSM基因,与GeneBank报告序列完全一致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抑制A375细胞生长的rhOSM蛋白.结论:本研究成功地克隆出hOSM基因并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了表达的基因重组蛋白具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的活性,为在真核细胞中进行稳定表达,深入研究rhOSM的生物学功能创造了条件.
关键词：hOSM基因COS-7细胞表达抑瘤作用
分类号：R730.45(一般性问题)R739.5(皮肤肿瘤)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 128-132 )
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