膜联蛋白A1基因合成及其真核表达载体的构建
解婧1
李萍2
于观贞2
王杰军2
1.200030,复旦大学附属肿瘤医院胰腺肝胆外科2.200070上海,第二军医大学附属长征医院肿瘤科
摘要：目的 探讨人膜联蛋白A1( ANXA1)基因的合成并构建其克隆载体.方法 根据ANXA1基因序列设计一对寡聚核苷酸引物,通过PCR反应合成一段长度为870bp的ANXA1基因.真核表达载体pEGFP-N3经Kpn Ⅰ& BamH Ⅰ限制性内切酶双酶切处理后与合成的ANXA1基因进行连接,连接产物转化E.coli DH5α感受态细胞进行扩增,并提取质粒进行鉴定.结果 PCR扩增获得ANXA1基因,对PCR产物及重组质粒酶切后的凝胶电泳鉴定证实为与理论设计目的片段大小( 870 bp)相符的DNA基因片段,并成功地转入克隆载体pEGFP-N3中.测序分析显示合成的目的基因与GenBank中ANXA1基因序列同源性为99％,整个表达载体阅读框正确无误.结论 成功构建了ANXA1基因pEGFP-N3表达载体,为下一步高效表达ANXA1蛋白和进一步研究其作用机理及应用价值打下基础.
关键词：膜联蛋白A1基因合成真核表达载体
分类号：R730.231(一般性问题)
资助基金：国家自然科学基金(30901794)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 289-292 )
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