靶向SMC1A基因慢病毒介导的RNA干扰对奥沙利铂治疗敏感性的影响
冯婉婷1
喻晓娟2
李进2
史玉叶2
曹维克2
邓之奎2
何敬东2
1.210029,南京医科大学2.223300,江苏淮安 南京医科大学附属淮安第一人民医院肿瘤内科
摘要:目的 探讨沉默结直肠癌细胞株染色体结构维持-1A(SMC1A)基因对奥沙利铂(L-OHP)敏感性的影响.方法 构建SMC1A基因的小分子RNA干扰表达质粒.与慢病毒包装质粒一起转染239T细胞制备pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒载体,并将重组质粒转染结直肠癌SW480、HT-29细胞株.RT-PCR、Western blotting法检测SMC1A mRNA和蛋白的表达情况.CCK-8法检测不同浓度L-OHP对细胞的抑制作用.结果 pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒载体构建成功,RT-PCR产物为343bp.RT-PCR显示重组质粒转染的SW480、HT-29细胞SMC1A mRNA表达量明显低于其对应的未转染细胞(0.13±0.02vs.1.02±0.06,0.182±0.019vs.1.114±0.032;P<0.05);Western blotting显示干扰后的细胞SMC1A蛋白表达受到明显抑制;不同浓度的L-OHP处理细胞48h后,CCK-8显示转染SMC1A-siRNA细胞生长抑制率较未转染细胞高,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 沉默结直肠癌细胞株SMC1A基因对奥沙利铂的敏感性显著增加,为临床进一步提高结直肠癌的疗效提供了研究基础.
关键词:RNA干扰慢病毒染色体结构维持-1A基因奥沙利铂
分类号:R735.3(消化系肿瘤)
资助基金:江苏省卫生厅医学科技发展基金会临床肿瘤学科科研项目(P200950)江苏省卫生厅面上资助项目(H200652)
论文发表日期:2012-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 398-402 )
英文信息
