血浆EGFR19外显子缺失突变高灵敏度检测技术的建立
谢丽1
尹震宇2
魏嘉1
禹立霞1
钱晓萍1
刘宝瑞1
1.210008,南京 南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心2.210008 南京 南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心; 210008 南京大学医学院附属鼓楼医院老年科
摘要：目的：探讨结合酶切及片段分析技术建立稳定的高灵敏度EGFR19外显子缺失突变检测技术检测血浆EG-FR19外显子缺失突变的价值。方法设计针对野生型片段的限制性内切酶予以降低野生型DNA背景。通过野生型和突变型序列的分析，以野生型序列为酶切底物，选择工具内切酶Tru1Ⅰ，设计内外两个PCR反应引物，且内侧引物一端予以标记绿色荧光。采用PCR-酶切-PCR-片段分析步骤，优化各反应条件，得到稳定的技术。以野生型DNA稀释突变型DNA检测该方法的灵敏度。采用上述方法检测42例肺癌患者外周血浆中EGFR19外显子突变情况。结果采用野生型DNA稀释突变型DNA模拟检测本方法的灵敏度，能够检测出1∶1000（ Mt∶Wt）突变型DNA。42例肺癌患者中5例血浆EGFR19外显子存在缺失，其中4例为15bp的缺失，1例为24bp的缺失。结论本研究建立了一种联合酶切与片段分析的高灵敏度血浆EGFR 19外显子缺失突变检测技术，能够有效从外周血中检测出EGFR19外显子缺失突变。
关键词：EGFR 19外显子缺失突变突变检测血浆
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81101816)南京市医学科技发展项目(YKK12063)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 407-410 )
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