miRNA-223对非小细胞肺癌A549／DDP细胞顺铂耐药性的影响

胡敏; 魏晓霞; 邹杰; 崔发财; 庞晓辉

摘要：目的：探讨microRNA?223（ miR?223）在非小细胞肺癌（ NSCLC） A549／DDP细胞对顺铂（ DDP ）耐药性方面的影响及可能机制。方法采用实时荧光定量PCR（ qRT?PCR）检测DDP耐药肺腺癌细胞株A549／DDP及其亲本细胞株A549中miR?223的水平，将A549／DDP细胞分为3组：对照组、空转染组（转染无关序列）和抑制组（转染miR?223 inhibitor），于转染24、48、72及96 h后分别采用qRT?PCR和CCK?8法检测转染效果及细胞增殖情况，CCK?8法评价转染后A549／DDP 细胞对DDP的药物敏感性变化，采用流式细胞术检测转染48 h后的细胞凋亡和细胞周期情况，Western blotting检测转染48 h后耐药基因蛋白P?糖蛋白（P?gp）、多药耐药相关蛋白1（MRP1）及肺耐药相关蛋白（LRP）的表达。结果 A549／DDP细胞中的miR?223水平较高，为A549细胞的（7?14±0?26）倍（P＜0?05）；抑制组转染后的miR?223水平降低，转染96 h后的miR?223水平分别降至对照组的（67?15±2?84）％和空转染组的（65?80±3?47）％，差异均有统计学意义（P＜0?05）；与对照组相比，抑制组转染后的增殖抑制率、凋亡率及G0／G1期细胞比例均升高，而S和G2／M期细胞比例及3种耐药基因蛋白水平均降低，以上差异均有统计学意义（P＜0?05）。 DDP对抑制组细胞的半数抑制浓度（IC50）值为（15?67±1?30）μg／ml，低于对照组的（33?71±2?61）μg／ml（ P＜0?05）。结论 miR?223可增加A549／DDP 细胞对DDP 的耐药性，可能与耐药基因蛋白表达上调有关；降低miR?223水平可抑制A549／DDP细胞增殖、诱导凋亡及细胞周期阻滞，并下调耐药蛋白的表达，从而增加A549／DDP 细胞对DDP的敏感性。