microRNA-545抑制宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响

闫峰; 席艳妮

摘要：目的：探讨microRNA?545（ miR?545）在宫颈癌组织及细胞系中的表达情况，并探讨其对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响。方法采用实时定量PCR（ qPCR）检测52例宫颈癌组织、30例宫颈上皮内瘤样变（ CIN）组织和25例正常宫颈组织石蜡包埋组织中的miR?545表达水平，分析miR?545表达与宫颈癌临床病理特征的关系，并检测其在宫颈癌细胞株Hela、Siha、CaSki、C33a及宫颈正常上皮细胞中的表达情况。采用miR?545的特异性过表达载体pcDNA6?2／GW／EmGFP?miR?545转染miR?545表达水平最低的宫颈癌细胞（过表达组），同时设pcDNA6?2／GW／EmGFP?miR空载体组和空白对照组。分析转染后Hela细胞的增殖水平（四甲基偶氮唑盐法）、凋亡情况（流式细胞仪Annexin V／PI双染法）及细胞周期（流式细胞仪PI单染法）。结果宫颈癌组织中miR?545的相对表达量为0?245±0?051，低于CIN组织的0?761±0?073和正常宫颈组织的1?027±0?024，差异有统计学意义（P＜0?05），且宫颈癌组织中 miR?545水平与临床分期、分化程度及淋巴结转移有关（P＜0?05）；与宫颈正常上皮细胞相比，宫颈癌细胞的miR?545水平均降低，由高到低依次为CaSki、C33a、Siha和Hela细胞；与空载体组和空白对照组相比，转染过表达载体细胞的增殖抑制率、凋亡率及G0／G1期细胞比例均升高，而S、G2／M期细胞比例均降低，差异有统计学意义（ P＜0?05）。结论 miR?545在宫颈癌组织和细胞中均为低表达，上调其水平可达到抑制增殖、诱导凋亡和阻滞细胞周期的作用，在宫颈癌防治中具有一定价值。