AFP介导慢病毒载体治疗荷人肝癌裸鼠移植瘤的实验研究?
王轩
王欣
袁振华
夏冰祥
张业伟
1.210009,南京 南京医科大学附属肿瘤医院普外科2.210009,南京 南京医科大学附属肿瘤医院普外科3.210009,南京 南京医科大学附属肿瘤医院普外科4.210009,南京 南京医科大学附属肿瘤医院普外科5.210009,南京 南京医科大学附属肿瘤医院普外科
摘要：目的：构建甲胎蛋白（AFP）介导的以沉默胰岛素样生长因子1型受体（IGF1R）和表达野生型p53（Wtp53）的重组慢病毒，探讨该慢病毒载体对肝癌干细胞CD45－CD90＋双靶点基因系统（ IGF1R和Wtp53）和对体内肝癌生长的抑制作用。方法从肝癌细胞 Hep3B 系中分离出肝癌干细胞 CD45－CD90＋细胞亚群，用携带 AFP?Wtp53?pPRIME?miR30?shRNA?IGF1R融合基因的慢病毒进行体外转染。利用RT?PCR和Western blotting检测IGF1R、WtP53在细胞内的表达，将荷人肝癌的移植瘤裸鼠随机分为空白对照组（腋下接种未感染任何病毒的CD45?CD90＋细胞）、空载体对照组（腋下接种感染空载体慢病毒pPRIME的CD45－CD90＋细胞）和实验组（腋下接种感染空载体慢病毒AFP?WtP53?pPRIME?miR30?shRNA?IGF1R的CD45－CD90＋细胞），检测各组的IGF1R表达，微血管密度和细胞凋亡程度。结果成功构建anti?AFP 介导的慢病毒；qRT?PCR和Western blotting检测显示，anti?AFP介导的慢病毒能表达Wtp53并同时干扰IGF1R的表达。体内实验显示，与空白对照组和空载体对照组相比，实验组肿瘤的潜伏期较长，肿瘤体积较小，瘤组织的IGF1R水平、微血管密度较低，但凋亡指数较高，差异有统计学意义（ P＜0?05）。结论 anti?AFP介导的慢病毒可高效特异性转染肝癌干细胞CD45－CD90＋双靶点基因系统，起到杀伤肝癌干细胞及抑制肝癌体内生长的作用。
关键词：CD45-CD90+细胞人胰岛素样生长因子1类受体靶向甲胎蛋白
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(61371066)江苏省医学重点人才项目(RC2011090)江苏省高层次人才培养工程"项目(2011Ⅲ-2640)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 961-966 )
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