shRNA靶向P AX6对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及上皮间质转化的影响
唐鑫
汪俊谷
何新斌
1.214431,江苏江阴 解放军第五一五医院肿瘤科2.214431,江苏江阴 解放军第五一五医院肿瘤科3.214431,江苏江阴 解放军第五一五医院肿瘤科
摘要：目的：探讨短发夹RNA（ shRNA）靶向沉默人类配对盒基因（ PAX6）对乳腺癌MCF?7细胞增殖、凋亡及上皮间质转化（ EMT）的影响。方法根据GenBank数据库中PAX6序列，设计、合成互补并特异性编码其 shRNA序列的寡核苷酸，克隆至线性化 pSUPER． puro 质粒载体中，将 pSuper． puro PAX6 shRNA 质粒（转染组）和阴性对照质粒 pSuper． puro luciferase shRNA（阴性对照组）分别转染人MCF?7细胞，建立稳定低表达PAX6的MCF?7细胞株，同时设未行转染的MCF?7细胞为空白对照组。经实时定量PCR验证后，噻唑蓝（ MTT）法检测各组转染24、48、72、96 h后的增殖抑制率，流式细胞术检测各组转染后的细胞凋亡和细胞周期情况，采用Western blotting检测各组转染96 h后的EMT相关标记分子（ E?钙粘蛋白、纤连蛋白和波形蛋白）水平。结果转染组的PAX6水平均低于阴性对照组和空白对照组（ P＜0?05）；与其余两组相比，转染组的增殖抑制率、凋亡率及促凋亡基因Bax、Bad mRNA水平均升高，而抑制凋亡基因Bcl?2 mRNA水平降低，且细胞周期的G0／G1期细胞比例升高，但S期和G2／M期细胞比例均降低，以上差异均有统计学意义（ P＜0?05）；转染组的钙粘蛋白水平升高，而纤连蛋白和波形蛋白水平均降低，与其余两组的差异均有统计学意义（ P＜0?05）。结论通过shRNA抑制PAX6基因表达可抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡和细胞周期阻滞，对EMT过程有一定抑制效果，为乳腺癌的基因沉默靶向治疗提供了依据。
关键词：短发夹RNA人类配对盒基因6乳腺癌增殖凋亡上皮间质转化
分类号：R730.51(一般性问题)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 967-971 )
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