RNA干扰卷曲螺旋结构域蛋白34表达对膀胱癌细胞生物学行为的影响
巩艳青
宁向辉
丁义
郭应禄
1.100034,国家泌尿男生殖系肿瘤研究中心2.100034,国家泌尿男生殖系肿瘤研究中心3.100034,国家泌尿男生殖系肿瘤研究中心4.100034,国家泌尿男生殖系肿瘤研究中心
摘要：目的 探讨卷曲螺旋结构域蛋白34(CCDC34)的表达对膀胱癌细胞生物学行为包括增殖、凋亡、克隆形成和侵袭能力的影响.方法 选取膀胱癌5637细胞分别转染阴性对照siRNA(阴性对照组)和CCDC34-siRNA(CCDC34干扰组)慢病毒载体,荧光显微镜观察慢病毒感染效率;实时荧光定量PCR和Western blotting验证CCDC34的干扰效率;BrdU掺入实验、流式细胞术、克隆形成实验和Transwell小室侵袭实验检测干扰CCDC34表达对5637细胞增殖、凋亡、克隆形成及侵袭能力的影响.结果 阴性对照组与CCDC34干扰组的慢病毒感染效率均在85％以上.与阴性对照组相比,感染CCDC34-siRNA的细胞中CCDC34 mRNA表达水平受到显著抑制(1.00±0.06 vs.0.16±0.01,P＜0.01),且CCDC34蛋白表达下降.BrdU实验显示,CCDC34干扰组的细胞增殖能力较阴性对照组受到显著抑制(P＜0.05),且细胞凋亡显著增加[(28.09±0.39)％ vs.(9.50±0.01)％,P＜0.01)].克隆形成实验显示,CCDC34干扰组的克隆形成能力显著低于阴性对照组(22±4 vs.310±5,P＜0.01).Transwell小室侵袭实验显示,CCDC34干扰组膀胱癌细胞的侵袭转移率显著低于阴性对照组(0.53±0.03 vs.2.58±0.10,P＜0.01).结论 慢病毒介导的RNA干扰技术可下调CCDC34蛋白在膀胱癌5637细胞中的表达,并显著抑制肿瘤细胞的增殖、克隆形成和侵袭能力;CCDC34有望成为膀胱癌的生物标记物和治疗的新靶点.
关键词：RNA干扰膀胱癌卷曲螺旋结构域蛋白34 (CCDC34)细胞增殖侵袭
分类号：R737.14(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81172419)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-5 )
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