miR-147靶向MDM2调控卵巢癌细胞Skov3增殖与凋亡的机制研究
柳家荣
王文义
1.467000,河南平顶山 平顶山平煤神马医疗集团总医院肿瘤内科四区2.467000,河南平顶山 平顶山平煤神马医疗集团总医院肿瘤内科四区
摘要：目的 探讨微小RNA-147(miR-147)靶向调控鼠双微粒体2蛋白(MDM2)的表达及其对卵巢癌细胞株Skov3增殖与凋亡的影响.方法 采用Lipo2000脂质体法将miR-147模拟物(mimics)及阴性对照(NC)转染至Skov3细胞并分为miR-147 mimics组和NC组,采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测转染48 h后Skov3细胞的miR-147水平以评价转染效果,分别采用MTT法及流式细胞术检测两组转染后的增殖及细胞凋亡情况,Western blotting检测两组MDM2、p53和caspase-3表达水平,采用双荧光素酶报告实验验证miR-147与靶标MDM2之间的靶向关系及结合位点.结果 QPCR检测显示,miR-147 mimics组miR-147的表达水平高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),提示在Skov3细胞中过表达miR-147成功.与NC组相比,miR-147 mimics组的增殖率和MDM2水平均降低,但凋亡率及p53和caspase-3水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);双荧光素酶报告实验检测发现miR-147可显著抑制野生型MDM2-3'端非翻译区(UTR)质粒转染细胞的荧光素酶活性,而对突变型MDM2-3'UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性并无影响.结论 miR-147可靶向MDM2的表达,且过表达miR-147表达可抑制Skov3细胞的增殖并诱导凋亡,在卵巢癌防治上有一定参考价值.
关键词：卵巢癌微小RNA-147(miR-147)增殖凋亡
分类号：R737.31(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 118-123 )
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