RNA干扰UHRF1基因表达对脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响
张勇1
丁涟沭2
1.242099,宣城人民医院神经外科2.223300江苏淮安,南京医科大学附属淮安第一医院神经外科
摘要：目的 探讨RNA干扰UHRF1基因表达对脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用脂质Attractene reagent将靶向沉默UHRF1的质粒LV-UHRF1-shRNA和阴性对照质粒LV-scramble-shRNA分别转染至U251细胞(LV-UHRF1-shRNA组和LV-scramble-shRNA组),以仅转染脂质体的细胞为对照组;采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测各组转染48 h后的UHRF1 mRNA水平,采用MTT法检测各组转染24、48、72 h的增殖情况,BrdU染色法检测转染12、24、48、72h后的BrdU阳性率,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测转染48、72 h后的凋亡率,Western blotting检测转染72 h后的凋亡相关蛋白(Bax、caspase-3和Bcl-2)水平.结果 QPCR检测结果显示对照组、LV-scramble-shRNA组和LV-UHRF1-shRNA组的UHRF1水平分别为1.098±0.136、1.127±0.193和0.309±0.073,LV-UHRF1-shRNA组的UHRF1水平低于对照组和LV-scramble-shRNA组(P＜ 0.05).与对照组和LV-scramble-shRNA组相比,LV-UHRF1-shRNA组在以上时间点细胞增殖率和BrdU阳性率均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);LV-UHRF1-shRNA组的凋亡率为(25.71±1.87)％,均高于对照组的(7.73±0.66)％和(7.86±0.59)％,差异有统计学意义(P＜0.05);Western blotting检测结果显示与对照组和LV-scramble-shRNA组相比,LV-scramble-shRNA组的Bax、caspase-3水平升高,而Bcl-2水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组和LV-scramble-shRNA组以上指标的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在U251细胞中的下调UHRF1可抑制增殖并诱导凋亡,UHRF1发挥类似癌基因的作用,可作为脑胶质瘤的治疗的候选基因.
关键词：脑胶质瘤UHRF1增殖凋亡
分类号：R739.41(神经系肿瘤)
资助基金：淮安市533英才工程科研项目(HAA201741)科技发展基金(HAS07025)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 508-513 )
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