miR-21靶向Atg5对非小细胞肺癌A549细胞自噬调控促进细胞增殖、迁移和侵袭的实验研究
高晓会1
张亚利1
张治业1
郭艳珍1
陈小兵2
1.河南科技大学第一附属医院肿瘤内科, 471003 河南洛阳2.郑州大学附属肿瘤医院河南省肿瘤医院肿瘤内科, 450003
摘要：目的 探讨miR-21通过靶向作用自噬相关靶基因5(Atg5)调控非小细胞肺癌(NSCLC)自噬的作用机制及其在A549细胞增殖、迁移及侵袭中的作用.方法 无义核酸序列NC(NC组)、miR-21模拟物(miR-21 mimics组)、miR-21抑制物(miR-21抑制组)分别转染A549细胞,CCK-8检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移能力; Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力.双荧光素酶报告实验验证miR-21和Atg5之间的靶向关系.Western blotting检测LC3B-II、p62和Atg5蛋白的表达.结果 与NC组比较,miR-21 mimics组细胞增殖、迁移、侵袭能力均上调,miR-21抑制组细胞增殖、迁移、侵袭能力均下调(P＜0. 05).双荧光素酶报告实验结果显示,miR-21显著抑制野生型Atg5 3'-UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性(P＜0. 05),但对突变型Atg5 3'-UTR的基因报告质粒与miR-21 mimics共转染之后,并未对荧光素酶活性产生影响.NC组LC3BII蛋白表达量为1. 24±0. 059,低于miR-21 mimics组的1. 98±0. 077,高于miR-21抑制组的0. 52±0. 021(P＜0. 05); NC组p62蛋白表达量为0. 62±0. 021,高于miR-21 mimics组的0. 45±0. 020,低于miR-21抑制组的0. 79±0. 031(P＜0. 05); NC组Atg5蛋白表达量为1. 17±0. 025,高于miR-21 mimics组的0. 38±0. 014,低于miR-21抑制组的1. 40±0. 039(P＜0. 05).与NC组比较,3-MA处理降低miR-21 mimics转染诱导的A549细胞增殖能力(P＜0. 05);划痕实验和Transwell实验表明,3-MA处理抑制了miR-21mimics转染诱导的A549细胞的迁移和侵袭,差异有统计学意义(P＜0. 05).结论 miR-21靶向Atg5调控NSCLC自噬促进细胞增殖、迁移和侵袭.
关键词：非小细胞肺癌miR-21自噬增殖凋亡
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81172240)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 97-101 )
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