miR-582-5p靶向抑制Rab27a对肺癌细胞生物学行为的影响
叶璐
母丹
杨莉
付波
王敏
1.核工业四一六医院成都医学院第二附属医院肿瘤科, 610000 成都2.核工业四一六医院成都医学院第二附属医院肿瘤科, 610000 成都3.核工业四一六医院成都医学院第二附属医院肿瘤科, 610000 成都4.核工业四一六医院成都医学院第二附属医院肿瘤科, 610000 成都5.核工业四一六医院成都医学院第二附属医院肿瘤科, 610000 成都
摘要：目的 探讨microRNA-582-5p(miR-582-5p)在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达及其对A549细胞增殖、侵袭的影响,以及对Rab27a基因的靶向调控作用.方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测33例行手术治疗的NSCLC患者的癌组织、对应癌旁组织以及A549细胞株、人正常支气管肺上皮细胞株BEAS-2B中miR-582-5p的表达水平.采用miR-582-5p inhibitor(anti-miR-582-5p)和miR-582-5p mimics(mim-miR-582-5p)转染A549细胞,另分别转染miRNA inhibitor无关系列(antiNC)和miRNA mimics无关系列(mim-NC)作阴性对照.采用双荧光素酶报告实验验证Rab27a与miR-582-5p的关系.采用MTT法和Transwell小室法检测各组细胞增殖、侵袭能力;采用QPCR和Western blotting检测各组A549细胞中Rab27a mRNA和蛋白水平.结果 NSCLC组织和癌旁组织中miR-582-5p表达水平分别为0. 26±0. 09和0. 83±0. 10; A549细胞株和BEAS-2B细胞株中miR-582-5p表达水平分别为0. 63±0. 08和1. 17±0. 09,差异均有统计学意义(P＜0. 05).anti-miR-582-5p组A549细胞24、48、72、96 h后的增殖率分别为(115. 68±4. 34)％、(130. 48±5. 48)％、(138. 95±5. 55)％、(147. 03±5. 69)％,明显高于anti-NC组; mim-miR-582-5p组A549细胞24、48、72、96 h后的增殖率分别为(91. 31±4. 18)％、(86. 74±3. 23)％、(79. 45±3. 20)％、(75. 22±4. 09)％,明显低于mim-NC组,差异均有统计学意义(P＜0. 05).Transwell小室结果显示,anti-miR-582-5p组A549细胞侵袭数为189±19,明显高于anti-NC组; mim-miR-582-5p组A549细胞侵袭数为55±8,明显低于mim-NC组,差异均有统计学意义(P＜0. 05).miR-582-5p可抑制野生型Rab27a 3'-UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型Rab27a 3'-UTR的荧光素酶活性无影响.anti-miR-582-5p组A549细胞Rab27a mRNA和蛋白表达水平分别为2. 01±0. 29和0. 85±0. 12,高于anti-NC组; mimi-miR-582-5p组A549细胞Rab27a mRNA和蛋白表达水平分别为0. 35±0. 08和0. 21±0. 05,明显低于mim-NC组,差异均有统计学意义(P＜0. 05).结论 上调miR-582-5p表达可抑制Rab27a表达,从而抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭活性,miR-582-5p有望成为肺癌新的治疗靶点.
关键词：非小细胞肺癌微小RNAmiR-582-5pRab27a增殖侵袭
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 102-107 )
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