假基因POU5F1B对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响?
余菁雯
朱萍
周留林
1.225400,江苏泰兴 蚌埠医学院附属泰兴市人民医院妇产科2.225400,江苏泰兴 蚌埠医学院附属泰兴市人民医院妇产科3.225400,江苏泰兴 蚌埠医学院附属泰兴市人民医院妇产科
摘要：目的 探讨POU结构域5类转录因子1B基因( POU5F1B)对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其可能的机制.方法 采用定时荧光定量PCR( QPCR)检测正常宫颈上皮End1／e6e7细胞株和宫颈癌细胞株( SiHa、HeLa和C33A)中POU5F1B的表达水平,选取POU5F1B表达量最高的细胞株分别转染POU5F1B特异性小干扰RNA( si?POU5F1B组)和阴性对照序列( si?NC组) .分别采用CCK?8实验、平板克隆形成实验和EdU实验观察细胞增殖情况,细胞划痕实验和侵袭实验观察两组细胞的迁移和侵袭情况,Western blotting实验检测OCT4蛋白的相对表达量,通过动物实验观察下调假基因POU5F1B对裸鼠体内移植瘤质量的影响.结果 与 End1／e6e7 细胞株比较,假基因 POU5F1B 在宫颈癌 SiHa、C33A、HeLa细胞株中的相对表达量分别为3. 34±0. 23、2. 03±0. 15和1. 13±0. 06,选取POU5F1B表达量最高的SiHa细胞进行后续实验. si?POU5F1B组假基因POU5F1B的相对表达量为0. 2±0. 012,明显低于si?NC组(P＜0. 01). CCK?8实验显示,与si?NC组相比,si?POU5F1B组吸光值明显降低( P＜0. 05);平板克隆形成实验显示,si?POU5F1B组的克隆形成数为(173±15. 27)个,低于si?NC组的(318±8. 41)个( P＜0. 01) . EdU检测显示,si?POU5F1B组阳性细胞比例为( 18±1. 36)%,低于si?NC组的(34±2. 63)%( P＜0. 01) .划痕实验显示,48 h后si?POU5F1B组的划痕愈合率为( 45. 60±2. 27)%,低于si?NC组的(87. 15±3. 32)%(P＜0. 01);侵袭实验显示,si?POU5F1B组穿过侵袭下室的细胞数为( 303± 10. 29)个,低于si?NC组的(933±11. 88)个(P＜0. 01);Western blotting检测显示,下调POU5F1B表达后,其亲本基因OCT4的表达水平下降( P＜0. 05);在动物实验中,si?POU5F1B 组裸鼠移植瘤质量为( 203. 50 ± 54. 83) mg,低于 si?NC 组的( 578. 06 ± 84. 66) mg( P＜0. 01) .结论 下调假基因POU5F1B可抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并抑制体内宫颈癌细胞生长,其机制可能与下调其功能基因OCT4的表达有关.
关键词：宫颈癌假基因POU结构域5类转录因子1B基因(POU5F1B)OCT4致癌基因
分类号：R737.33(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81702377)江苏省妇幼健康科研资助项目(F201515)蚌埠医学院研究生科研创新计划(Byycx1747)医院科研项目(try1727)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 577-583 )
英文信息