微小RNA-3677靶向调控B细胞易位基因1表达及对肝细胞癌细胞侵袭迁移的影响
魏世平
尹晓燕
田新利
李宏勇
李娜
摘要：目的 探讨微小RNA-3677(miR-3677)对B细胞易位基因1(BTG1)的靶向调控作用及肝细胞癌(HCC)细胞HepG2侵袭和迁移的影响.方法 采用脂质体Lipofectamine 2000向HepG2细胞转染miR-3677抑制剂(Inhibitor组)和阴性对照序列(NC组)并以未行转染的细胞为对照组,采用实时定量PCR(QPCR)检测miR-3677水平,划痕实验和Transwell实验分别检测划痕宽度和穿膜细胞数目,双荧光素酶报告基因实验验证miR-3677与BTG1的靶向关系,QPCR检测BTG1、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)和信号转导和转录激活因子3(STAT3)的mRNA水平,Western blotting检测BTG1、MMP-9、STAT3和磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)的蛋白水平.结果 QPCR结果显示Inhibitor组的miR-3677水平为0. 241± 0. 059,低于对照组的1. 012±0. 123和NC组的1. 147±0. 168( P＜0. 05);Inhibitor组的穿膜细胞数和划痕相对宽度分别为(96. 5± 9. 2)个和(62. 15± 3. 29)%,均优于对照组的(174. 5±12. 9)个和(37. 45±2. 16)%及NC组的(181. 6±16. 4)个和(39. 47±2. 82)%,差异有统计学意义(P＜0. 05). miR-3677模拟物抑制了BTG1野生型3′端非翻译区的荧光素酶活性,而对突变型的无影响.与其余两组相比, Inhibitor组的BTG1表达水平升高,而MMP9和p-STAT3的水平降低(P＜0. 05).结论 下调miR-3677水平可抑制HCC细胞的迁移侵袭,该miRNA发挥癌基因的作用,可能与通过靶向BTG1以激活JAK／STAT3信号传导有关,为HCC提供一个新的潜在治疗靶点.
关键词：肝细胞癌微小RNA-3677侵袭迁移B细胞易位基因1
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
论文发表日期：2019-01-01
页数：5( 690-694 )
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