微小RNA-146b靶向调控HuR表达及对甲状腺癌细胞上皮间质转化的影响
马祯
庞怀霞
杨宝良
赵孝芳
黄祥荣
1.810000,西宁 青海省红十字医院耳鼻喉头颈外科2.810000,西宁 青海省红十字医院耳鼻喉头颈外科3.810000,西宁 青海省红十字医院耳鼻喉头颈外科4.810000,西宁 青海省红十字医院耳鼻喉头颈外科5.810000,西宁 青海省红十字医院耳鼻喉头颈外科
摘要：目的 探讨微小RNA-146b( miR-146b)靶向调控人抗原 R( HuR)表达及对甲状腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测正常甲状腺上皮细胞Nthyori3-1和甲状腺癌细胞8505C的miR-146b水平;脂质体法向8505C细胞分别转染miR-146b抑制物( Inhibitor组)和阴性对照( NC组),采用QPCR检测miR-146b水平,活细胞计数CCK-8试剂盒和碘化丙啶单染流式细胞术检测增殖和细胞周期分布情况,QPCR和Western blotting检测EMT相关指标(上皮型钙黏蛋白、神经型钙黏蛋白和波形蛋白)及HuR的水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-146b与HuR的靶向关系.结果 8505C细胞的miR-146b水平为2. 953±0. 674,高于Nthyori3-1细胞的1. 012±0. 061( P＜0. 05). Inhibitor组的miR-146b水平为0. 281±0. 035,低于对照组的1. 001±0. 052和NC组的1. 023±0. 075( P＜0. 05).与对照组和NC组相比,In-hibitor组转染48、72 h的细胞活力减弱,G0／G1 期细胞比例升高,而S和G2／M期细胞比例降低( P＜0. 05);Inhibitor组的上皮型钙黏蛋白和波形蛋白水平降低,而神经型钙黏蛋白和HuR水平升高(P＜0. 05).对照组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P＞0. 05). miR-146b模拟物能够抑制野生型HuR 3’端非翻译区的荧光素酶活性,而对突变型无影响.结论 甲状腺癌细胞中miR-146b高表达,且下调该miRNA可抑制增殖和EMT相关指标的表达并诱导细胞周期G0／G1 期阻滞,可能通过靶向HuR来发挥促癌作用.
关键词：甲状腺癌微小RNA-146b上皮间质转化人抗原R
分类号：R736.1(内分泌腺肿瘤)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 961-966 )
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