微小RNA-145-5p对结肠癌细胞增殖凋亡和FSCN1表达的影响
朱琳
曾庆松
王续
1.473058,河南南阳 南阳医学高等专科学校第一附属医院消化内科2.473058,河南南阳 南阳医学高等专科学校第一附属医院消化内科3.473058,河南南阳 南阳医学高等专科学校第一附属医院消化内科
摘要：目的 探讨微小RNA-145-5p(miR-145-5p)对结肠癌细胞增殖、凋亡和Fascin-1( FSCN1)表达的影响.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测人正常结肠上皮NCM460细胞和结肠癌HCT116细胞的miR-145-5p水平;体外常规培养HCT116细胞并分为对照组、过表达组和抑制组,过表达组转染miR-145-5p模拟物mimics,抑制组则转染miR-145-5p抑制物inhibitor,而对照组不作特殊处理.采用QPCR、活细胞计数CCK-8、Annexin Ⅴ-FITC／PI双染流式细胞术和Western blotting检测miR-145-5p水平、增殖活力、凋亡率和FSCN1水平;构建FSCN1基因3’端非翻译区( 3’UTR)野生型和突变型重组 psi-CHECK2荧光素酶报告载体并通过双荧光素酶报告基因系统验证miR-145-5p与FSCN1的靶向关系.结果 HCT116细胞的miR-145-5p水平为0. 281±0. 072,低于NCM460细胞的1. 062±0. 226( P＜0. 05).与对照组的1. 103±0. 214相比,过表达组的miR-145-5p水平升高至4. 159±1. 080,而抑制组则降低至0. 348±0. 052;与对照组相比,过表达组转染48、72 h后的增殖活力降低,而抑制组则升高;与对照组的(7. 539±1. 413)%相比,过表达组的凋亡率升高至(17. 126±4. 274)%,而抑制组则降低至(2. 658±0. 725)%;与对照组的0. 521±0. 078相比,过表达组的FSCN1水平降低至0. 243±0. 034,而抑制组则升高至0. 769± 0. 092;以上组间差异均有统计学意义(P＜0. 05).与转染突变型FSCN1 3’UTR的荧光素酶报告载体相比,miR-145-5p mimics能降低FSCN1 3’UTR野生型的荧光素酶活性(P＜0. 05),但对突变型无影响( P＞0. 05).结论 miR-145-5p在结肠癌细胞中低表达并发挥抑癌作用,该miRNA可能通过靶向FSCN1来调控癌细胞的增殖并促进其凋亡,有望成为结肠癌的新型生物诊治靶点.
关键词：结肠癌微小RNA-145-5p增殖凋亡Fascin-1
分类号：R735.3(消化系肿瘤)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 999-1003 )
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