微小RNA-448对非小细胞肺癌细胞侵袭迁移和ZEB2表达的影响
焦敏
郭卉
王淑红
孙红
秦天洁
1.710061 西安 西安交通大学第一附属医院肿瘤内科2.710061 西安 西安交通大学第一附属医院肿瘤内科3.710061 西安 西安交通大学第一附属医院肿瘤内科4.710061 西安 西安交通大学第一附属医院肿瘤内科5.710061 西安 西安交通大学第一附属医院肿瘤内科
摘要：目的 探讨微小RNA-448 (miR-448)对锌指E盒结合的同源盒蛋白2(ZEB2)的靶向调控作用及非小细胞肺癌(NSCLC)细胞侵袭迁移的影响.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测人正常支气管上皮细胞16HBE和NSCLC细胞A549的miR-448水平;脂质体Lipofectamine 3000向A549细胞转染miR-448模拟物(过表达组)和阴性对照序列(NC组)并设仅行脂质体处理的细胞为对照组,采用QPCR、四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术、划痕实验、Transwell实验和Western blotting检测A549细胞的miR-448水平、增殖活力、凋亡率、划痕愈合率、穿膜细胞数和ZEB2水平;TargetScan在线预测miR-448的可能靶点并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-448对ZEB2的靶向调控作用.结果 A549细胞的miR-448水平为0.214±0.019,低于16HBE细胞的1.146±0.183(P＜0.05).与其余两组相比,过表达组转染24、48 h后的增殖活力降低(P＜0.05).过表达组的miR-448水平、凋亡率、划痕愈合率、穿膜细胞数和ZEB2水平分别为8.256±1.306、(31.152±2.675)％、(40.262±3.964)％、(196.021±19.626)个和0.482±0.073,均优于NC组的1.083±0.375、(12.327±2.642)％、(58.611±6.514)％、(346.926±24.892)个和0.667±0.079及对照组的1.064±0.203、(13.452±1.904)％、(60.767±5.125)％和(339.568±25.927)个和0.683±0.061(P＜0.05).NC组和对照组上述指标的差异无统计学意义(P＞0.05).经miR-448模拟物处理后,转染野生型ZEB2 3’端非翻译区质粒细胞的相对荧光强度低于转染突变型质粒(P＜0.05).结论 miR-448在NSCLC细胞中低表达且上调其水平可抑制增殖和侵袭迁移能力并诱导凋亡,可能通过靶向ZEB2来发挥抑癌作用.
关键词：非小细胞肺癌微小RNA-448侵袭迁移锌指E盒结合的同源盒蛋白2
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81402422)陕西省自然科学基金(2014JQ4156)
论文发表日期：2019-12-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1068-1073 )
英文信息