过表达miR-149对胃癌SGC-7901细胞干样特性和肿瘤微环境以及裸鼠成瘤的影响
张小路1
杜梅红2
彭银杰1
万鑫1
张建刚1
岳大成1
刘新1
王世东1
1.450002 郑州 河南省中医院 河南中医药大学第二附属医院普外一科2.450002 河南省中医院 河南中医药大学第二附属医院磁共振室
摘要：目的 探讨miR-149对胃癌细胞干细胞样特性、炎症反应和体内裸鼠成瘤的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-149在不同的人胃癌细胞系和健康胃上皮细胞中的表达;胃癌细胞系SGC-7901分为3组:对照组(未转染组)、miR-NC组(转染miR-NC)和miR-149 mimics组(转染miR-149 mimics序列),qRT-PCR检测miR-149的表达;CCK-8检测各组SGC-7901细胞的活力;流式分选乙醛脱氢酶(ALDH)阳性细胞;Western blotting检测SGC-7901细胞中性别决定相关基因簇2(SOX2)和八聚体结合蛋白4(OCT4)的蛋白表达以及NF-κB p65的磷酸化;ELISA检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-6和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量.转染miR-NC和miR-149 mimics的胃癌SGC-7901细胞分别在裸鼠皮下接种,每5 d测量肿瘤体积并记录,30 d后称量瘤重量,qRT-PCR检测瘤组织中miR-149的表达;免疫组化检测瘤组织中OCT4的表达.结果 与健康人胃上皮细胞GES-1比较,胃癌细胞中miR-149的表达显著下调(P<0.05).与对照组比较,miR-149 mimics组SGC-7901细胞中miR-149的表达明显上调,细胞活力显著下降,ALDH阳性细胞数目明显减少,SOX2和OCT4蛋白表达显著下调,NF-κB p65的磷酸化水平明显降低,细胞上清液中IL-6和iNOS的含量明显降低,以上差异均有统计学意义(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-149 mimics组裸鼠移植瘤的体积和重量明显减小(P<0.05),瘤组织中OCT4阳性细胞数目明显减少(P<0.05).结论 miR-149在胃癌中可能通过抑制干细胞样特性、细胞因子分泌和NF-κB p65的磷酸化发挥抑癌功能.
关键词：胃癌miR-149乙醛脱氢酶SOX2OCT4NF-κB p65
分类号：R735.2(消化系肿瘤)
资助基金：河南省医学科技攻关计划(LHGJ20191021)
论文发表日期：2021-05-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 404-410 )
英文信息