MiR-28-5p靶向DOK4对口腔鳞状细胞癌细胞增殖的影响
魏校通1
闫威2
陈勇2
田志峥嵘3
赵凤云4
1.061000 河北沧州 沧州市中心医院口腔颌面外科2.061000 河北医科大学附属沧州教学医院口腔颌面外科3.061000 沧州市中心医院超声科4.061000 沧州市妇幼保健院超声科
摘要：目的 探讨微小RNA(miR)-28-5p通过靶向酪氨酸激酶下游蛋白 4(DOK4)对口腔鳞状细胞癌细胞增殖的调控作用.方法 下载癌症基因组图谱(TCGA)口腔癌数据库,分析miR-28-5p、DOK4 与口腔鳞状细胞癌临床表型的关系;转染miR-28-5p模拟物(mimics)、miR-28-5p抑制剂(inhibitor)及对照物(NC)、pcDNA3.1-DOK4 及空载体(Vector)、DOK4 干扰序列(siDOK4).CCK-8法和克隆集落形成实验检测口腔鳞状细胞癌的细胞增殖能力;检测各组细胞的抗氧化能力和细胞活性氧(ROS)含量;双荧光素酶报告基因实验验证miR-28-5p与DOK4 的靶向关系;观察DOK4 过表达对细胞增殖和口腔鳞状细胞癌裸鼠移植瘤生长的影响.结果 生物信息学分析显示,相较于癌旁口腔组织,miR-28-5p在口腔鳞状细胞癌组织中表达上调,DOK4 mRNA下调(P<0.05);临床分期Ⅳ期、M1 期、G3～G4 分级患者miR-28-5p水平高于临床分期Ⅰ～Ⅲ期、M0 期、G1～G2 分级者(P<0.05);临床分期Ⅳ期、N1 期、G3～G4 分级患者DOK4 mRNA水平低于临床分期Ⅰ～Ⅲ期、N0 期、G1～G2 分级者(P<0.05);DOK4 高表达组无进展生存期和总生存期均高于DOK4 低表达组(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-28-5p inhibi-tor组miR-28-5p水平、细胞活性和集落形成数降低(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-28-5p mimics组DOK4 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与Vector组比较,DOK4 过表达组细胞和移植瘤组织中DOK4 mRNA和蛋白表达升高,细胞活性、集落形成数、肿瘤体积及重量降低(P<0.05);与miR-28-5p inhibitor组比较,miR-28-5p inhibitor+siDOK4 组的DOK4 mRNA和蛋白表达水平降低,细胞增殖活性、集落形成数、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH/NADP+)、谷胱甘肽/氧化性谷胱甘肽(GSH/GSSG)升高,ROS含量降低(P<0.05).结论 miR-28-5p在口腔鳞状细胞癌中表达上调,通过靶向抑制DOK4 表达,降低ROS水平,促进细胞增殖.
关键词：口腔鳞状细胞癌增殖微小RNA-28-5p酪氨酸激酶下游蛋白4活性氧
分类号：R739.8(口腔、颌面部肿瘤)
资助基金：沧州市科技支撑计划资助项目(204106135)
论文发表日期：2024-01-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 22-30 )
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