枸杞多糖通过下调PD-L1表达抑制胆囊癌细胞增殖、侵袭及免疫逃逸的实验研究
辛国军1
张亚文1
雷鹏2
王俊青3
卜阳1
杨勇1
王建承4
1.750001 银川 宁夏回族自治区人民医院(宁夏医科大学附属自治区人民医院)肝胆外科2.750003 宁夏医科大学总医院肝胆外科3.200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院肝胆外科4.200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院胰腺外科中心
摘要：目的 探讨枸杞多糖(LBP)对胆囊癌细胞增殖、侵袭以及免疫逃逸的影响.方法 QBC939 和SGC-996 胆囊癌细胞分为LBP组、Control组、LBP+pcDNA组和LBP+PD-L1 组;将外周血单个核细胞(PBMCs)与植物血凝素(PHA)共孵育,记为PHA组,未共孵育的PBMCs记为NC组;上述各组QBC939 和SGC-996 细胞分别与PBMCs共孵育,分为PHA+Control组、PHA+LBP组、PHA+LBP+pcDNA组和PHA+LBP+PD-L1 组.CCK-8、流式细胞术和Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力;收集健康捐献者的外周血,采用Ficoll-Conray密度梯度法分离PBMCs,ELISA试剂盒检测PHA诱导的PBMCs中IFN-γ的释放.qPCR和Western blotting法检测程序性死亡配体 1(PD-L1)的表达量.结果 相较于Control组,LBP 组QBC939 和SGC-996 细胞增殖(48.00±8.00 vs.100±9.17;39.67±4.51 vs.100±7.00)及侵袭(61.33±8.63 vs.110.33±12.50;51.00±8.00 vs.118.67±14.01)受到抑制,细胞凋亡率升高[(21.10±2.03)%vs.(6.67±1.31)%;(24.30±2.11)%vs.(6.20±1.60)%],差异有统计学意义(P＜0.05).此外,与PHA组比较,PHA+Control组IFN-γ含量降低(2.37±0.15 vs.0.76±0.12,3.11±0.25 vs.1.04±0.19);相较于PHA+Control组,PHA+LBP组IFN-γ含量升高(1.84±0.12 vs.0.76±0.12,2.52±0.20 vs.1.04±0.19).与Control组比较,LBP组QBC939 或SGC-996 细胞中PD-L1 mRNA(1.00±0.07 vs.0.30±0.08,1.00±0.09 vs.0.21±0.07)以及蛋白(1.00±0.11 vs.0.47±0.08,1.00±0.08 vs.0.32±0.07)含量显著降低(P＜0.05).相较于LBP+pcDNA组,LBP+PD-L1 组QBC939或SGC-996 细胞细胞活力增强[(48.33±7.02)%vs.(86.00±6.56)%;(40.33±7.02)%vs.(79.33±7.03)%],细胞凋亡率降低[(20.36±3.01)%vs.(13.30±2.01)%;(24.50±1.93)%vs.(14.30±1.77)%],以及细胞侵袭增强(56.67±10.01 vs.90.33±9.61;48.33±9.61 vs.95.67±9.50;P＜0.05);与PHA+LPB+pcDNA组比较,PHA+LPB+PD-L1 组PAH诱导的PBMCs IFN-γ释放显著降低(1.86±0.16 vs.0.77±0.12,P＜0.05).结论 枸杞多糖通过下调PD-L1 的表达抑制胆囊癌细胞增殖,侵袭以及免疫逃逸.
关键词：胆囊癌枸杞多糖LBP免疫逃逸增殖PD-L1
分类号：R735.8(消化系肿瘤)
资助基金：宁夏回族自治区自然科学基金资助项目(2023AAC03506)
论文发表日期：2024-06-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 521-525 )
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