微小RNA-218调控胃癌细胞增殖迁移和上皮间质转化的机制研究
褚敏1
惠怡华1
岳意茹1
张丽1
谢戬芳2
1.北京大学第一医院太原医院消化内科,山西 太原 0300092.山西医科大学第二医院风湿免疫科,山西 太原 030001
摘要：目的 探究微小RNA-218(miR-218)调控胃癌细胞增殖迁移和上皮间质转化(EMT)的机制.方法 采用人胃癌细胞BGC823 和 SGC7901 及正常胃上皮细胞 GES-1,通过转染 miR-218 模拟物(miR-218 mimics)、miR-218 抑制剂或scrambled miRNA对照序列进行功能研究.为验证B细胞淋巴瘤Mo-MLV插入区域 1(BMI1)是否参与miR-218 的抗肿瘤作用,在SGC7901 细胞中通过回复实验进行验证,即共转染miR-218 mimics和BMI1 过表达质粒.采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测miR-218 和BMI1 mRNA表达,蛋白质印迹分析EMT标志物[上皮钙黏蛋白(E-cad)、神经钙黏蛋白(N-cad)、波形蛋白(Vim)和扭曲相关蛋白 1(TWIST1)]及BMI1 的蛋白水平.通过甲基噻唑基四唑法和划痕实验评估细胞的增殖和迁移能力.双荧光素酶报告基因实验证实miR-218 对BMI1 3′非翻译区(3′UTR)的直接靶向作用.结果 与正常胃上皮细胞GES-1相比,发现miR-218 在胃癌 SGC7901 和 BGC823 细胞中表达下调(P<0.001),而 BMI1 在 mRNA 和蛋白水平均上调(P<0.001).功能实验表明,miR-218 在胃癌中发挥抑癌作用:过表达miR-218 可显著抑制细胞增殖和迁移能力(P<0.05),而抑制miR-218 则促进这些恶性表型.此外,miR-218 可调控EMT进程,上调上皮标志物E-cad,同时下调间质标志物N-cad、Vim和TWIST1.生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验证实,miR-218 可直接结合BMI1 mRNA的 3′UTR并抑制其蛋白表达(P<0.05),但不影响BMI1 的mRNA水平.回复实验进一步验证了BMI1 在miR-218 介导的抑癌作用中的关键角色:外源回补BMI1 可逆转miR-218 对胃癌细胞增殖、迁移及EMT的抑制作用.结论 miR-218 在胃癌中低表达,并通过靶向抑制BMI1 发挥抑癌作用.miR-218/BMI1 轴可能是胃癌治疗的潜在靶点.
关键词：胃癌微小RNA-218B细胞淋巴瘤Mo-MLV插入区域1增殖迁移上皮间质转化
分类号：R735.2(消化系肿瘤)
资助基金：山西省重点研发计划项目(201803D31127)太原市科技项目(202253)
论文发表日期：2025-07-28
在线出版日期：2025-10-17（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 638-644 )
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